猪瘟活疫苗（兔源）

猪瘟活疫苗（兔源）
　　Zhuwen Huoyimiao（Tu Yuan）

　　Classical Swine Fever Vaccine，Live（Rabbit Origin）

　　 本品系用猪瘟病毒兔化弱毒株（CVCC AV1412）接种兔或乳兔，收获感染兔的脾脏及淋巴结或乳兔的肌肉及实质脏器，制成乳剂，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。用于预防猪瘟。

　　 【性状】 海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。

　　 【无菌检验】 按附录 页进行检验，应无菌生长。如果有菌生长，应进行杂菌计数和病原性鉴定（附录 页）。每头份非病原菌应不超过75个。

　　【支原体检验】 按附录 页进行检验，应无支原体生长。

　　【外源病毒检验】 （1）用兔检验 用1.5～2.0 kg兔4只，每只耳静脉注射疫苗1.0ml（含10头份），观察14日，应健活。

　　（2）其他检验 按附录 页进行检验，应无外源病毒污染。

　　 【鉴别检验】 将疫苗用灭菌生理盐水稀释成每毫升含有100个兔MID的病毒悬液，与等量抗猪瘟病毒特异性血清充分混合，置10～15℃作用60分钟，其间振摇2～3次。同时设病毒对照和生理盐水对照。中和结束后，分别耳静脉注射兔2只，每只1.0 ml，按效力检验项（1）进行观察和判定。除病毒对照组应出现热反应外，其余2组在接种后120小时内应不出现热反应。

　　 【安全检验】 （1）用小动物检验 按瓶签注明头份，将疫苗用灭菌生理盐水稀释成5头份/ml，皮下注射体重18～22 g小鼠5只，各0.2 ml，肌肉注射体重350～400 g豚鼠2只，各1.0 ml，观察10日。应全部健活。

　　 （2）用猪检验 选用无猪瘟病毒中和抗体（检测方法见附注）的断奶猪，接种前观察5～7日，每日上、下午各测体温一次。挑选体温、精神、食欲正常的使用。每批疫苗按瓶签注明头份用灭菌生理盐水稀释成6 头份/ml，肌肉注射猪4头，每头5.0 ml（含30 头份）。接种后，每日上、下午各观察并测体温1次，观察21日。体温、精神、食欲与接种前相比没有明显变化；或体温升高超过0.5℃，但不超过1℃，稽留不超过4个温次；或减食不超过1日。如果有1头猪体温升高1℃以上，但不超过1.5℃，稽留不超过2个温次，疫苗也可判为合格。如果有1头猪的反应超过上述标准；或出现可疑的其他体温反应和其他异常现象时，可用4头猪重检1次。重检的猪仍出现同样反应，疫苗应判为不合格。也可在猪高温期采血复归猪2头，每头肌肉注射可疑猪原血5.0 ml，测温观察16日。如果均无反应，疫苗可判合格。如果第1次检验结果已经确证疫苗不安全，则不应进行重检。

　　 【效力检验】 下列方法任择其一。

　　 （1）用兔检验 按瓶签注明头份，将疫苗用灭菌生理盐水稀释成1/150头份/ml，耳静脉注射体重1.5～3.0 kg兔2只，每只1.0 ml。接种后，上、下午各测体温1次，48小时后，每隔6小时测体温1次，根据体温反应和攻毒结果进行综合判定。

　　 接种疫苗后，兔的体温反应标准如下：

　　 定型热反应（++） 潜伏期48～96小时，体温上升呈明显曲线，至少有3个温次升高1℃以上，并稽留18～36小时。如稽留42小时以上，则必须攻毒（接种新鲜脾淋毒或冻干毒），攻毒后如果无反应，可判为定型热。

　　 轻热反应（+） 潜伏期48～96小时，体温上升呈明显曲线，至少有2个温次升高0.5℃以上，并稽留12～36小时。

　　 可疑反应（±） 潜伏期48～96小时，体温曲线起伏不定，稽留不到12小时；或潜伏期在24小时以上，不足48小时及超过96小时至120小时出现热反应。

　　 体温反应呈二次高峰，有一次高峰符合定型热反应（++）或轻热反应（+）标准者，均须攻毒。攻毒后无反应时，该兔的热反应可判为定型热或轻热反应。

　　 无反应（－） 体温正常。

　　 结果判定 接种疫苗后，当2只兔均呈定型热反应（++），或1只兔呈定型热反应（++）、另1只兔呈轻热反应（+）时，疫苗判为合格。

　　接种疫苗后，当1只兔呈定型热反应（++）或轻热反应（+），另1只兔呈可疑反应（±）；或2只兔均呈轻热反应（+）时，可在接种后7～10日攻毒。

　　攻毒时，加对照兔2只，攻毒剂量为50～100倍乳剂。每只兔耳静脉注射1.0 ml。

　　 攻毒后的体温反应标准如果下：

　　 热反应（+） 潜伏期24～72小时，体温上升呈明显曲线，升高1℃以上，稽留12～36小时。

　　 可疑反应（±） 潜伏期不到24小时或72小时以上，体温曲线起伏不定，稽留不到12小时或超过36小时而不下降。

　　 无反应（－） 体温正常。

　　 攻毒后，当2只对照兔均呈定型热反应（++），或1只兔呈定型热反应（++），另1只兔呈轻热反应（+），而2只接种疫苗兔均无反应（－），疫苗判合格。

　　 接种疫苗后，如果有1只兔呈定型热（++）或轻热反应（+），另1只兔呈可疑反应（±）或无热反应（－），可对可疑反应兔或无反应兔采用扑杀剖检或采心血分离病毒的方法，判明是否隐性感染；或接种疫苗后，2只兔均呈轻热反应，亦可对其中1只兔分离病毒。方法是：接种疫苗后96～120小时之间，将兔扑杀，采取脾脏，用生理盐水制成50倍稀释的乳剂（脾脏乳剂应无菌），或采取心血（全血），耳静脉注射2只兔，每只1.0 ml。凡有1只兔潜伏期24～72小时出现定型热反应（++），疫苗可判为合格。

　　 接种疫苗后，由于出现其他反应情况而无法判定时，可重检。用兔做效力检验，应不超过3次。

　　 （2）用猪检验 将疫苗用生理盐水稀释成每1/150头份/ml，肌肉注射无猪瘟中和抗体的猪4头，每头1.0 ml，接种后10～14日，连同对照猪3头，各注射猪瘟病毒石门系血毒1.0 ml（不低于105.0 MLD），观察16日。对照猪应全部发病，且至少死亡2头，免疫猪应全部健活或稍有体温反应，但无猪瘟临床症状。

　　 【剩余水分测定】 按附录 页进行测定，应符合规定。

　　 【真空度测定】 按附录 页进行测定，应符合规定。

　　 【作用与用途】 用于预防猪瘟。接种后4日产生免疫力。断奶后无母源抗体仔猪的免疫期，脾淋苗为18个月，乳兔苗为12个月。

　　 【用法与用量】 肌肉或皮下注射。按瓶签注明头份，用生理盐水稀释成1头份/ml，每头1.0 ml。

　　 在没有猪瘟流行的地区，断奶后无母源抗体的仔猪，接种1次即可。有疫情威胁时，仔猪可在2l～30日龄和65日龄左右时各接种1次。

　　 断奶前仔猪可接种4头份疫苗，以防母源抗体干扰而导致免疫效果降低。

　　 【注意事项】 （1）应在8℃以下的冷藏条件下运输。

　　 （2）使用单位收到冷藏包装的疫苗后，如保存环境超过8℃而在25℃以下时，从接到疫苗时算起，限10日内用完。

　　（3）接种时，应作局部消毒处理。

　　 （4）接种后应注意观察，如出现过敏反应，应及时注射肾上腺素治疗。

　　（5）稀释后，如气温在15℃以下，6小时内用完，如气温在15～27℃，则应在3小时内用完。

　　（6）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。

　　【规格】 （1）5头份/瓶 （2）10头份/瓶 （3）20头份/瓶 （4）50头份/瓶 （5）100头份/瓶

　　 【贮藏与有效期】 －15℃以下保存，有效期为12个月。

　　

　　 附注: 猪瘟病毒中和试验方法

　　 1 先测定猪瘟病毒兔化弱毒（抗原）对兔的最小感染量（MID）。试验时，将抗原用灭菌生理盐水稀释成100个兔MID/ml，作为工作抗原（如果抗原对兔的MID为10－5.0/ml，则将抗原稀释成1000倍使用）。

　　 2 将被检猪血清分别用灭菌生理盐水作2倍稀释，与含有100个兔MID/ml的工作抗原等量混合，摇匀后，置10～15℃中和2小时，其间振摇2～3次。同时设含有相同工作抗原量加等量生理盐水（不加血清）的对照组，与被检组在同样条件下处理。

　　 3 中和完毕，被检组各注射兔1～2只，对照组注射兔2只，每只兔耳静脉注射l.0 ml， 观察体温反应，并判定结果。

　　 4 结果判定 体温反应标准同效力检验项。当对照组2只兔均呈定型热反应（++），或1只兔呈定型热反应（++）、另1只兔呈轻热反应（+）时，方能判定结果。被检组如果用1只兔，须呈定型热反应；如果用2只兔，每只兔应呈定型热或轻热反应，被检血清判为阴性。

　　 5 注意 如被检组用2只兔，其中1只兔无反应或呈可疑反应时，可采血复归或对2只兔进行攻毒。如被检血清出现阳性反应或复归兔仍为可疑反应时，则该头被检猪不得用于猪瘟疫苗的安全（或效力）检验。被检组用1只兔时，不得复归或攻毒。用中和试验方法选择易感猪，无论是否同窝猪，均须逐头检测。

　　

　　修订说明：

　　1. 【性状】项：删除对颜色的描述。

　　2. 【外源病毒检验】（1）用兔检：将“皮下注射”改为“静脉注射”。——经试验研究，静脉注射更为敏感（已由专家完成了相关试验）。

　　3. 【安全检验】项：将“稀释成每毫升含6 头份”改为“稀释成6 头份/ml”。——规范文字。

　　4. 【效力检验】（2）用猪检验：将攻毒剂量“（含105.0 MLD）”改为“（不低于105.0 MLD）”。——更符合实际操作。

　　5. 增加【作用与用途】、【用法与用量】和【注意事项】项。