【性状】本品为淡褐色澄明液体。
【无菌检验】依法检验(附录l69页),应无菌生长。
【特异性检验】琼扩平板中心孔加口蹄疫病毒感染相关(VIA)抗原,外周孔加各型阳性血清(A、O、C、Asia I型健康豚鼠高免血清或人工感染后30日的康复牛血清),结果均应为阳性反应。
【作用与用途】用于检测牛、羊、猪、鹿、骆驼等动物血清中的VIA抗体。
【用法与判定】(1)被检血清和口蹄疫标准阳性血清均在56℃灭能30分钟。
(2)琼脂糖平板的制备 取琼脂糖lg,Tris低盐溶液100ml,装入三角瓶中,于沸水中加热或高压使琼脂糖融化。然后吸取琼脂液7mI加到直径5.5cm的平皿内。制成3mm厚的琼脂板。待琼脂完全凝固后,加盖置于湿盒中,贮藏在4℃冰箱中备用。
(3)打孔和加样 按六角形打孔,中心孔和外周孔的孔径及孔距均为4mm。中心孔加V1A抗原,1孔和4孔加口蹄疫阳性血清,2、3、5、6孔加被检血清。
(4)扩散和观察 将加样的琼脂平皿置湿盒内于室温(20~22℃)下任其自然扩散。24小时进行第一次观察,72小时作第二次观察,168小时作最后观察。观察时,可借助灯光或自然光源,特别是弱反应需借助于强光源才能看清沉淀线。
(5)判定 当1孔和4孔标准阳性血清与中心抗原孔之间形成沉淀线时,若被检血清孔与中心孔之间也出现沉淀线,并与阳性沉淀线末端相融合,则被检血清判为阳性。被检血清孔与中心孔之间虽不出现沉淀线,但阳性沉淀线的末端向内弯向被检血清孔,则被检血清判为弱阳性;如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,且阳性沉淀线直向被检血清孔,则被检血清判为阴性。
【规格】(1)lml/瓶 (2)2ml/瓶 (3)4ml/瓶
【贮藏】2~8℃保存,有效期为10个月。
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