黄连黄连素薄层层析鉴别方法及条件探讨

提要 列举了不同制剂中黄连、黄连素薄层层析(TLC)鉴别方法及条件，为令后在制剂中有效成分黄连青的分析及测定提供参考。
黄连来源于毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch、三角叶黄连Coptis deltoidea C．Y．Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall．的干燥根茎。性苦寒，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，为常用清热燥湿、泻火解毒药。黄连古多种生物碱成分，黄连索为其重要的化学成分之一。TLC鉴别方法在中药制剂中常用于黄连的定性
检验，但因中药剂型与制剂较多，黄连应用广泛，定性检测方法也有不同，为了便于查阅与选择．觋将黄连索的TLC鉴别方法及条件选择摘录如下。
1 方法
取黄连粉束50mg．加甲酵5ml，承褡回流15min，滤过，滤液补甲酵使成5 ml．供试.盐酸小檗碱对照品制成量含0.5 mg／ml的溶液。点样各1μL，以荤-醋酸乙酯-甲酵-异丙酵-水(6：3:1.5 ： 1.5： 0.3)为展开剂．并置蒸气饱和的层析缸内展开．紫外灯(365nm)下，检视黄连、黄连素的黄色黄光斑点。
取黄连养肝丸10g．剪碎，加硅藻土15g．研碎，加甲酵30ml，滤过，滤液作供试品溶液。另取黄连药材O.1g，加甲酵l0ml，超声处理15min，滤藏为对照药材溶液。上两种溶液各点样l0μL于硅胶G 薄层板上，以苯-醋酸乙醇:甲酵:异丙酵-浓氨试藏(12：6:3:31)为展开剂．置氨蒸气预饱和15min的层析缸内展开，置紫外灯(365nm)下．检视与对照药材色谱相应位置上的黄色荧光斑点.
取小儿暑感宁糖浆3O m1．用乙酸乙醇萃取2次，20 ml／次，合并萃取液，挥干，残渣加O.5 ml溶解为供试液。另取盐酸小檗碱加乙醇制成含量lmg／ml的溶藏．为对照品液。取样品液5μl，对照品藏1～2μl．点于同一硅胶G薄层板上，以正丁酵-冰醋酸-水(7：l：2)为展开剂展开，置紫外光灯(365nm)下观察，用于检视黄连、盐酸小檗碱(黄色荧光斑点)。
取葛根芩连胶囊2粒．加术l00 ml，煮沸30min，滤取上清液l0ml．水浴蒸干，残留物用5ml甲醇溶液滤过，得供试品液。取黄连素以甲醇配制lmg/ml的溶液为对照品藏。用硅胶G-CMC板．以乙酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10：7：5：3)为展开剂展开，喷以改良碘化铋钾溶被．置紫外灯(365nm)下观察，以检视黄连、黄连素黄绿色荧光斑点。
取复方黄连索片5片．去糖衣研细，取粉末约1g，加甲酵索氏提取至近无色．为供试品液。另取盐酸小檗碱配成l mg／ml的溶液为对照品溶液。两溶被各取2μl点于硅胶G-CMC扳上，以正丁醇-冰醋酸-水(7：l：2)为展开剂，日光下检视黄连、盐酸小檗碱(黄色斑点)：紫外灯(254nm或365nm)下检视小檗碱(黄绿色荧光斑点) 。
取香连九60mg，研碎，加甲醇5ml，水浴加热提取15min滤过．滤液补加甲醇使成5ml为供试藏。另取小檗碱以甲醇制成O.5 mg／ml的溶液为对照品液。各点样lμl于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙醇-甲酵-异丙酵-浓氨试液(6：3 ：1.5 ：1.5：O.5)为展开剂展开，置紫外灯(365nm)下观察，检视黄连、小檗碱(黄色荧光斑点)。
取导赤丸l丸，剪碎，加硅藻土1g，研匀，置具塞三角瓶中．加甲醇lOml冷浸lh，滤过，滤液为供试品液。另取盐酸小檗碱以甲醇配成每O.5 mg／ml的溶液为对照品溶液 点样品液2～ 3μl，对照品液10μl于同一硅胶G 薄层板上，以正丁醇-冰醋酸一水(7：1：2)为展开剂，展开．置紫外灯(365nm)下观察，检视黄连中小檗碱(黄色斑点)。
取朱砂安神丸10g，8O℃下干燥，研细，加乙醇回流lh．滤过，滤液浓缩至lml．为供试品液。另取盐酸小檗碱，用适量乙醇溶解，点样2μl于同一硅胶G薄层板上，以正丁酵-36％ 醋酸-水(7：2：1)为展开剂展开，于紫外灯(254nm)下观察，用于检视黄连中小檗碱(黄绿色荧光斑点)。
取黄连解毒汤粉末4.5g置锥形瓶中，加木30ml，加热30min，滤过，滤液蒸干残渣加甲醇2Oml溶解，作供试品藏。取黄连药材2g，置锥形瓶中，以下同上述方法制备对照药材溶藏。吸取上述各滤液lOμ1，点于同一硅胶GF254．薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7：2：1)为展开剂展开．于紫外灯(254nm)下观察，用于检视黄连中小檗碱(黄绿色荧光斑点)。
取黄连解毒汤粉末4.5g置锥形瓶中，加水30ml加热3Omin，滤过．滤液蒸干残渣加甲醇2Oml溶解，作供试品藏。取黄连药材2g，置锥形瓶中，以下同上述方法制备对照药材溶液。吸取上述各溶液l0μ1，点于同一硅胶GF254．薄层板上．以正丁醇-冰醋酸-水(7：l：2)为展开剂展开，置(365nm)紫外灯下，检视黄连中的黄色荧光斑点。
薄层层析法l将样品的甲酵提取液点于硅胶G板上．以苯-乙酸乙醇-甲醇-异丙醇浓氨试液(12：6：3：3：1)展开，(须先用氨蒸汽饱和)，紫外灯(365nm)下检枧，黄连、小檗碱呈黄色荧光斑点。
薄层层析法2 将样品的甲酵提取藏点于硅胶G板上，以氯仿-甲醇-氨水(15：4：1)展开，天然光下小檗碱呈黄色，紫外光(254 m)下显亮黄绿色斑点。用改良碘化铋钾试藏显色，斑点显红色 。
2 小结
综上有关黄连的TLC方法及条件，可见制剂不同，方法有别在应用中．可根据实际状况及所具备的条件，进行取样、展开剂等灵活选择。使TLC方法更方便的为黄连质量检测服务，使中药质量跨上新的台阶。