HPLC法鉴别五味子与南五味子

关键词：HPLC法；鉴别；五味子；南五味子
五味子为木兰科植物五味子Schisandra Chinensis(Turcz)Bail1．的干燥成熟果实，习称“北五味子”，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效? 。南五味子为木兰科植物华东五味子
Schisandra sphenanthe Rehd．et Wills．的干燥成熟果实，功效与五味子相似。中药成方制剂中都明确指定用何种五味子，且《中国药典)2000年版分别单独制定了质量标准。市场上这两种五味子价格相差较大，因此鉴别很重要。《中国药典)2000年版收载的标准中有薄层色谱鉴别，都采用了五味子甲素作为对照品，再分别用各自的对照药材作对照。作者多次实验结果表明薄层色谱鉴别对两种五味子鉴别专属性不强。本文则采用HPLC法进行鉴别，重复性好、灵敏度高且直接分析的是其特征峰，鉴别结果不受环境等因素干扰，为五味子的鉴别提供了可靠的手段。
1 仪器和试药
1．1 仪器：高效液相色谱仪(泵：SP1000，检测器UV2000，N2000工作站，美国光谱物理公司)。
1．2 试药：五味子对照药材(批号：0922—9803中国药品生物制品检定所)；五味子(毫州恒丰药材公司)；南五味子(毫州恒丰药材公司)。色谱纯甲醇；超纯水。
2 方法与结果
2．1 对照药材溶液的制备：取五味子对照药材粉末约0．25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇约18 mL，超声处理(功率250 W ，频率20 kHz)30分钟，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
2．2 色谱条件：色谱柱：AllitimaC18(4．6 mm×250 mm)。流动相：甲醇．水(13：7)。检测波长：250 nm。流速：0．8mL／min。柱温：25℃ 。
2．3 供试品溶液的制备
2．3．1 五味子药材提取液的制备：取五味子药材粉末(过3号筛)约0．25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇约18 mL，超声处理30分钟，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
2．3．2 南五味子药材提取液的制备：取南五味子药材粉末(过3号筛)约0．25 g，置25 mL量瓶中，加甲醇约18 mL，超声处理30分钟，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
2．4 图谱的绘制：分别精密吸取对照药材溶液与供试品溶液各20 L，注入液相色谱仪，测定，见表1。
从表1中可以看出，五味子对照药材共9个峰，样品五味子共8个峰，南五味子共6个峰，样品五味子与对照药材相比少1个峰，其它峰保留时间都一致，南五味子少了3个峰，且只有1个峰相一致，由此，可以鉴定出五味子。经过多次实验结果，对照药材1、2、6、7、8号峰是五味子的主要特征峰，且峰面积较大。
3 小结与讨论
高效液相色谱法以保留时间为主要鉴别参数，若因仪器厂家、色谱柱等条件不同，则保留时间可能产生较大差异，导致图谱鉴定操作性不强，而采用对照药材作为对照。排除了上述因素的影响。峰号具体成分因无法买到对照品而不能确定。药厂采购五味子时，掺杂南五味子时有发生，应仔细对照药典标准进行鉴别，当初步鉴定为五味子，或者若怀疑有部分为南五味子时，则可以挑选出这两种五味子。再与对照药材分别进行HPLC图谱鉴别，方法简便可行。