延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang 的干燥茎块。2005版《中国药典》收载的含量测定方法为高效液相色谱法，以延胡索乙素为指标成分。现介绍常用的含量测定方法。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》延胡索含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）（55：45）为流动相；检测波长为280nm.理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.5克，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入浓氨试液-甲醇（1：20）混合溶液，称定重量，冷浸1小时后加热回流1小时，放冷，再称定重量，用浓氨试液-甲醇（1：20）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密吸取续滤液25ml;，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的HPLC法测定延胡索乙素含量时，以采用药典规定的色谱条件为多，也有采用其它分析条件的。如：石上梅等测定消痛片中延胡索乙素的含量时采用的流动相为甲醇-磷酸盐溶液 (65：35， 磷酸二氢钾0.1g和磷酸氢二钾4.8g混合溶解于500ml水中)，检测波长为282nm；谢彩娟等用RP-HPLC法同时测定延胡索药材中延胡索乙素与原阿片碱的含量时，以甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH=7．68，V：V=65：35)流动相，检测波长281nm；等等。现分别举一例。
吴立成等测定元胡止痛胶囊中延胡索乙素的含量。采用WATERS型高效液相色谱仪(510泵，490E紫外检测器)。HS色谱数据工作站V4.0+(杭州英谱科技开发有限公司)。流动相：甲醇-0.1％磷酸(用三乙胺调pH至6.0)(60：40)，色谱柱：DiamonsilTM Cl8(250mm×4.6mn，5μm)，流速：1.0mL/min，波长：280nm。明延胡索乙素在0.102～1.632μg之间有良好的线性关系。供试品溶液的制备同药典方法。
王利胜等测定糖尿康胶囊中延胡索乙素的含量。高效液相色谱仪：Waters 600E泵，RHEODYNE 7725i进样器，Waters PA13996二极管阵列检测器；Waters M32色谱工作站；：lnertsil ODS-3 C18柱(4.6mm×25cm, 5μm)(大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：甲醇-水-三乙胺(65：35 )；检测波长：280nm；柱温：室温；流速：0.8ml/min。延胡索乙素在进样量为0.2108μg～1.8972μg范围内具有良好的线性关系。供试品溶液的制备：取本品内容物2g，加入具塞锥形瓶中，加浓氨水2ml润湿，加入***20ml，超声处理lO分钟，滤取***，同样处理3次，合并***液，用无水硫酸钠脱水，水浴挥干，残渣用甲醇溶解定容至lOml，作为供试品溶液。
二、薄层扫描法
⑴单波长扫描
常用的实验条件：
①硅胶G薄层板；展开剂：正己烷-氯仿-甲醇(7.5：4：1)；显色：饱和碘蒸气，熏10 min；检测波长365nm。供试品溶液的制备：取本品（安中片）2O片，包衣片除去包衣，精密称定，研细，精密称取3 g，置5Oml具塞锥形瓶中，滴加浓氨3ml，润湿30min，加***40ml，避光冷浸24h，超声提取15min，滤过，滤渣与容器用***清洗3次，每次1Oml，洗液并人滤液，置水浴40℃蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶内，稀释至刻度，摇匀，即得。
②硅胶G薄层板,展开剂：环已烷-氯仿-甲醇(7.5：4：2)；显色：碘蒸气熏30分钟；紫外反射锯齿扫描，检测波长345nm。供试品溶液制备：取本品（保康冲剂）2包，倾出内容物，研细，精密称取约1.2g于100ml磨口锥形瓶中，准确加水2ml，使浸润，准确加甲醇50ml，摇匀，密塞，置超声波清洗器内超声30分钟，取出，放冷，滤过，准确量取续滤液40ml置磨口锥形瓶中，蒸干，残留物加水10ml，盐酸1滴，溶解，加***洗两次，每次10ml，弃去***液，水层加氨水调pH10，摇匀，全部转移到分液漏斗中，加经处理的***(取***500ml，加氨试液20ml，振摇2分钟，分取***层，用全玻璃蒸馏器蒸馏，收集35℃馏份)提取3次，每次用量20ml，合并***液，加水5ml洗1次，水洗液加经处理的***10ml回提1次，合并***液，通过无水硫酸钠滤过，蒸干，残留物准确加甲醇lml溶解，作为供试品溶液。
⑵双波长扫描
常用的实验条件：
①展开剂：苯-石油醚(90～120℃)-甲醇-三氯甲烷(V：V：V：V，3：3：0.5：10)；测定波长340nm，参比波长365nm。供试品溶液制备：精密称取本品（复方延胡索片）2g，置100mL三角锥形瓶中，加少许氨水润湿，加95％乙醇(5O，3O，2O，20 ml)超声提取(25，20，15，15min)，滤过，用20mL95％乙醇分两次淋洗滤渣，合并滤液，水浴蒸干后，用无水乙醇定容至2mL，摇匀，备用。
②硅胶G薄层板上；展开剂：苯-丙酮(8：2)为展开剂展开，取出、晾干，喷以改良碘化铋钾试液；测定波长500nm，参比波长700nm。取本品（定腹宁片）6片，研细，精密称定，加氨水5ml，密塞放置20min后，加***50ml，超声处理3次，每次20min，滤过，合并滤液，挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并转移至2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
③硅胶G；展开剂：正己烷-氯仿-甲醇(10：6：1)；显色剂：碘蒸气；测定波长：430nm，参比波长550nm。供试品溶液的制备：取本品（气滞胃痛片）20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取约10g，加乙醇50ml，超声处理40min，放冷，滤过，滤渣及器皿用乙醇洗涤2次，每次10mL，合并滤液及洗液，蒸干，残渣加水10mL溶解，加氟试液使呈碱性，加***提取3次(20，20，10mL)，合并***提取液，蒸干，残渣加适量乙醇使溶解，移至5ml量瓶中,并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
④硅胶G；展开剂：正己烷-醋酸乙酯-二乙胺(9：1：1)；显色剂：碘蒸气；参比波长310nm，测定波长350nm。供试品溶液的制备：精密称取痛消胶囊内容物10g，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流至提取液无色，提取液回收甲醇至干，残渣加10％醋酸溶液20ml,分次定量转移至25 ml棕色量瓶中，超声处理10min，放冷至室温，加10％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，放置2h，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液15ml，用***洗涤2次，每次1Om1，***液用10％醋酸溶液5ml提取，提取液并人上述醋酸溶液中，加浓氨溶液调pH8～9，用***50ml提取4次(15、l5、10、10)。合并***液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，定量转移到2ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。
三、毛细管电泳法
毛细管电泳分离测定延胡索乙素的文献报道较少，济南的张强等采用高效毛细管区带电泳测定克心疼缓释片中的延胡索乙素。毛细管柱：75μm×80.5cm(有效长度72.5cm，未涂层)；运行缓冲液：0.05mol/L磷酸盐(pH6.0)-30％甲醇；操作温度：30℃；运行电压：30kV；检测波长：200nm，对峰面积进行时间校正；正极进样1 kPa×5s。每次进样前依次用0.1mol/L氢氧化钠溶液冲洗柱1min，二次蒸馏水冲洗1min，缓冲液冲洗2min。样品制备：精密称取克心疼缓释片约0.5g，用pH3的盐酸50mL浸泡30min后，回流提取2次，每次20min，合并提取液，调pH为8～9，用氯仿(50，30，20mL)萃取3次，合并萃取液，水浴挥干氯仿，残留物用甲醇转移至5ml容量瓶中并定容至刻度。
魏惠珍等采用毛细管电泳法测定元胡止痛片和元胡止痛口服液中延胡索乙素的含量。未涂层石英毛细管(河北永年光导纤维厂生产) 总长度57cm，有效长度50cm，内径50μm；缓冲液：0.2mol/L Tris-45mmol/L磷酸二氢钠(磷酸调pH5.30)-40％异丙醇；分离电压：29 kV；检测波长为200nm；每次进样前分别用0.1mol/L 的盐酸、氢氧化钠和缓冲液冲洗5min；进样方式：压力进样2s。操作温度：25℃。样品溶液的配制：取元胡止痛片20片，小心除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于10片的重量)，置圆底烧瓶中，加浓氨水1ml，***50ml回流2h，定量转移置100ml量瓶中，加***至刻度。滤过，取续滤液80ml置蒸发皿中，在水浴上蒸干后，残渣用甲醇溶解，转移至5ml的量瓶中，加入内标溶液0.5mL，加甲醇至刻度，摇匀，即得。