独活为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim.f. biserrata Shan etYusn的干燥根。2005版《中国药典》一部收载的含量测定方法为采用高效液相色谱法,以蛇床子素为指标成分。文献报道的独活及其制剂的含量测定方法主要为高效液相色谱法等。
2005版《中国药典》独活含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(60:40)为流动相,检测波长为322nm;理论板数按蛇床子素峰计算应不低于6000。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.5克,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,称定重量,超声处理(功率300W,频率15kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过;精密量取续滤液5ml,置20ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
文献报道的HPLC法:
承云等测定寄生追风液中蛇床子素的含量,采用Gilson 液相色谱仪,ODS 柱(150mm×4.6mm, 5Lm) 为分析柱,ODS预柱;流动相为甲醇-0.1mol/L硫酸铵溶液(70∶30), 用硫酸溶液(1→5) 调节pH为2.5;流速1.0ml/min;柱温35℃;检测波长322nm。样品用***振摇提取3次, 每次10ml,水浴温度挥干***控制在45℃。
徐以亮等测定独活药材及配方颗粒中蛇床子素的含量,采用Waters 600E高效液相色谱仪;色谱柱: Kromasil C18 (中国科学院大连化学物理研究所);流动相:甲醇-水-磷酸( 375∶125∶1 );检测波长322nm;柱温室温;流速1.0mL/min。样品用甲醇超声处理。
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