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荜茇含量测定方法(胡椒碱)

     网络  2015-12-24 12:08:00
【导读】荜茇为胡椒科植物荜茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果实。2005《中国药典》一部以胡椒碱为指标,二甲氨基苯甲醛为内标,采用高效液相色谱法测定含量。文献报道的方法基本上为高效液相色谱法。一、高效液相色谱法2005《中国药典》...

荜茇为胡椒科植物荜茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果实。2005《中国药典》一部以胡椒碱为指标,二甲氨基苯甲醛为内标,采用高效液相色谱法测定含量。文献报道的方法基本上为高效液相色谱法。
一、高效液相色谱法
2005《中国药典》荜茇含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(77:23)为流动相,检测波长为343nm。理论板数按胡椒碱峰计算应不低于1500。

供试品溶液的制备:取本品中粉约0.25克,精密称定,置100ml棕色量瓶中,加无水乙醇约80ml,超声处理(功率250W,频率20kHz)至少30分钟,放置至室温后,加无水乙醇至刻度,药匀,滤过,取续滤液加内标溶液,摇匀,即得。
文献报道的HPLC方法,采用的色谱条件基本上为药典方法,现将实验条件总结如下:

实验仪器中较常用的HPLC仪为:

①FRANK-2000P 型高效液相色谱仪(配有色谱工作站),Kromasil C18色谱柱(4.6mm×200mm, 5μm) 大连依利特公司;

②Waters高效液相色谱仪,Nova-Pak C18柱(3.9×150mm,10μm)色谱柱;
供试品溶液的制备方法,常见的为采用超临界CO2萃取法提取,也有有以无水乙醇、氯仿-浓氨试液等为提取溶剂,采用超声法提取。

另外,韩文彬等采用一阶导数差示脉冲极谱法测定荜茇中胡椒碱的含量时,采用DP-A型微分脉冲极谱仪,实验中将仪器功能置FDDPP处, 选用滴汞电极为工作电极, 滴汞间隔为16s;银-氯化银电极为参比电极, 内装110mol/LKCl参比溶液;微铂电极为辅助电极, 以稳定电极电压, 使参比电极不受影响, 预置电压为-0.160V, 扫描范围为-0.16~-1.26V;电流灵敏度为5μA/V;扫描速度为100mV/s;脉冲振幅为40mV。荜茇药材取中粉,无水乙醇超声处理后加入少许盐酸。本方法是在差示脉冲极谱法基础上建立起来的一种新技术, 其特点是提高了方法的分辨率、分析速度和灵敏度, 基本上消除了空气中氧的干扰, 不需事先通氮脱氧,用于荜茇中胡椒碱的测试分析,简便、经济、灵敏、快速,可做为胡椒碱的定性参考。

二、薄层扫描法

阿古拉等用双波长薄层扫描法,对六味木香散中有效成分胡椒碱进行含量测定。采用岛津CS-9301 型双波长薄层扫描仪(日本)。薄层展开条件:硅胶G板,展开剂为苯-醋酸乙酯-无水甲醇(8:2:0.5)。扫描条件:扫描方式为反射法锯齿扫描,Sx=3 ,狭缝0.4×0.4mm,测定波长λs=335nm,参比波长λR=215nm。六味木香散以氯仿-氨水溶液为溶剂,浸渍提取。

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