薄层扫描法测定清火栀麦片中穿心莲内酯的含量

摘要 采用薄层扫描法对清火栀麦片中主要有效成份穿心莲内酯的含量进行测定，方法简单、重复性好，可作为清火栀麦片的质量控制指标之一。
关键词：穿心莲内酯；薄层扫描法；含量测定
穿心莲为爵床科植物穿心莲的干燥地上部分，主要栽培于广东、广西、福建等地区，其主要成份为穿心莲内酯，具有清热解毒，消肿止痛的功效。为了进一步控制清火栀麦片的质量，以穿心莲内酯为指标，采用薄层扫描法测定其含量，结果可靠、准确，方法简单、快捷。
1 仪器与试药
CS-9301型双波长薄层扫描仪(日本岛津)，定量点样毛细管，薄层层析用高效硅胶GF254板(青岛海洋化工厂)，穿心莲内酯(中国药品生物制品检定所)，清火栀麦片(广西金海堂制药厂)，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 供试品溶液的制备取本品lO片，除去糖衣，精密称定，研细，称取粉末0.7g，加石油醚(60～9O℃)30ml，加热回流3O分钟，弃去石油醚液，残渣挥去石油醚液，加无水乙醇溶解，转移至5ml容量瓶中，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2．2 对照品溶液的制备精密称取穿心莲内酯对照品，加无水乙醇制成每1ml含0.55mg的溶液。
2．3 薄层色谱条件高效硅胶GF254板(10cm×10cm)，105℃活化3O分钟，展开剂：氯仿-醋酸乙酯-无水乙醇(9：6：1)展距8cm，置紫外灯254nm下检视，定位。温度：lO～3O℃，湿度：50％～70％。
2．4 薄层扫描条件 双波长锯齿扫描，选定测定波长为370nm，参比波长为228nm，狭缝1.25mm×1.25mm，Sx=3，按外标两点法计算供试品溶液中穿心莲内酯的含量。
2．5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液1.0μl、2.0μl、3.0μl、4.0μl、5.0μl，点于同一薄层板上，按上述条件展开，定位后扫描测定，以点样量对峰面积作回归方程：Y= ll9.3226232+ l443064.847m．r=0.9996
线性范围：0.55～2.75μg
2．6 阴性对照 取不含穿心莲的阴性样品，同2．1供试品溶液制备项下的方法制成阴性对照溶液，按同法测定，在与对照品相应的位置上无斑点。
2．7 稳定性试验 精密吸取对照品溶液(0.55mg／m1)l l，用定量毛细管点于同一高效硅胶GF254板上，按上述条件层析定位，扫描测定，每隔3O分钟测定峰面积1次，连续3小时，面积积分值基本不变，其RSD=2.43％(n=6)。
2．8 精密度试验在同一高效硅胶GF254薄层板上，点穿心莲内酯对照品溶液lμl，依次点5点，按上述方法层析定位后，扫描测定各斑点面积积分值，其RSD=2.18％，表明具有较好的精密度。
2．9 加样回收率试验 取5份供试品(批号20000618)，每份称取0.7g，按上述方法操作，每次各加入穿心莲内酯对照品溶液(O.55mg／m1)5ml，定溶于lOml容量瓶中，按上述方法测定，测得平均回收率为98.3％，RSD为2.32％(n=5)。
2．1O 供试品测定 精密吸取供试品溶液2tA和对照品溶液lμl、3μl，分别交叉点于同一高效硅胶GF254板上，依法展开，定位后，扫描测定。
3 讨论
3．1 本实验采用薄层扫描法测定清火栀麦片中穿心莲内酯的含量，是因为该方法结果准确、可靠、重现性好，且较高效液相色谱法简单、快捷、成本低，可作为清火栀麦片的质量控制指标之一，故采用了该方法。
3．2 在紫外灯254nm下定位时，应在荧光斑点上、下各lcm处定位，扫描时，应在距离斑点0.5cm处开始扫描，否则影响扫描效果。