高效液相色谱法测定心可宁胶囊中丹参酮ⅡA含量

心可宁胶囊由丹参、三七、冰片等八味药材加工而成，收载于中华人民共和国卫生部药品标准中成方制剂第九册。功能活血散瘀，开窍止痛。用于冠心病、心绞痛、胸痛、心悸、眩晕。部颁标准以性状、鉴别和胶囊剂通则有关规定检定其质量，没有定量测定方法。按中医组方理论，丹参在心可宁胶囊中为君药，具有改善心肌缺血，抑制血栓形成等药理作用。丹参酮ⅡA是丹参中重要有效成分，丹参酮ⅡA的含量测定方法已有报道 ，心可宁胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定方法未见报道。本实验建立了高效液相色谱测定心可宁胶囊中丹参酮ⅡA含量的方法。
1 仪器与试药
1．1 仪器：日本岛津公司LC—6A液相色谱泵，SIL-6B自动进样器，SPD-6AV紫外可见分光光度检测器，C-R 6A色谱数据处理器。
1．2 试药：丹参酮ⅡA对照品购自中国药品生物制品检定所。实验用生药饮片由本院中药房提供，经药检室检定符合中国药典规定。心可宁胶囊根据部颁标推自制。甲醇为色谱纯。对照品储备液为105.6μg／ml丹参酮ⅡA
甲醇溶液。
2 方法与结果
2．1 色谱条件：LUNAC18分析色谱柱(4.6mmID X250mm，粒径5μm，柱温35℃，流动相为甲醇-水(85：15)，流速0.7ml／min；检测波长270nm。在此色谱条件下，测得丹参酮ⅡA对照品，心可宁胶囊丹参阴性样品和心可宁胶囊样品色谱图。在图中，丹参酮ⅡA与其相邻峰的分离度为3.4，理论板数为19459。
值X(n=3)对进样浓度Y(μg／m1)线性回归，得回归方程Y=0.3028+0.002921X，r=0.9996，线性范围2.64—52.8 μg/ml。将对照品稀释后进样，以基线噪音3倍计算，最低检出浓度为0.05μg/ml。
2．3 仪器精密度和方法重复性：同一样品溶液重复进样5次，记录色谱峰面积，求得RSD为0.54％。同一批心可宁胶囊重复取样测定5次，记录色谱峰面积，求得RSD为1.60%。
2．4 加样回收率：按样品测定项下方法，精密称取心可宁胶囊6份，其中5份分别加入丹参酮IIA对照品，另外1份作空白。各份均以样品测定项下方法测定含量，求得平均回收率为104.1％，RSD为0.42％。
2．5 样品测定：取心可宁胶囊20粒，除去囊壳。取内容物混匀，精密称取适量(约相当丹参10g)，置100mL磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量。超声提取20min，放冷至室温，再称定重量，补足损失的甲醇，摇匀。取少量用微孔滤膜(0．45pan)滤过，弃取初滤液，取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录丹参酮ⅡA色谱峰面积，外标法计算含量。测定了3批样品，丹参酮ⅡA含量分别是0.10、0.075和0.074／粒。
3 讨论
经稳定性实验，样品液在实验温度（22℃）下置棕色量瓶中，丹参酮ⅡA至少在48h内稳定。
本法操作简便、测定结果准确可靠，可用于心可宁胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定。
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