一贴舒膜剂中黄芩甙的含量测定

摘要 目的：建立一贴舒膜剂中黄苓甙的含量测定方法。方法：采用TLC法分离黄芩甙，刮板洗脱后用紫外分光光度法测定含量。结果：样品液中含黄芩甙浓度为0.1mg/ml，每块膜(4cmX5cm)中含黄芩甙0.5mg。结论：所建立的方法对处方中的黄芩甙可准确地定性、定量检测。
一贴舒为一复方制剂，具有消炎、止血、收敛的功效。黄芩甙作为其中的主要有效成分之一，更是具有抗菌消炎、镇静解热之功。本文用标准曲线法测定一贴舒中黄芩甙的含量，并对黄芩甙的稳定性进行考察，确定该制剂的最佳保存条件，以达到临床使用的需要。
l 实验材料7520-分光光度计，上海分析仪器厂；TU-1221紫外可见分光光度计，北京通用仪器设备公司，所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2．1 药物的处理
2．1．1 药物有效成分的提取 取黄芩甙、黄柏、五倍子各3kg，加水适量，水煎3次，煎煮时间分别为40、30、30min，合并水煎液，浓缩、放冷，加95％ 乙醇至醇含量达到60％ ，静置24h，取上清液，减压过滤，用6o％乙醇定容至500Oml，待用。
2．1．2 药液小样的处理从上述药液中提出100ml，加入颠茄流浸膏4g，鞣酸2g使溶，水浴蒸去乙醇及水分，得稠膏后加入70％ 乙醇定容至200ml，得样品液。取出lml用70％乙醇定容至25ml，再从此溶液中吸取lml，定容至25ml，进行紫外扫描，λmax=277.6nm。
2．1．3 成膜 膜剂4cm x 5cm记，板规格为10cm x 20cm，以1O0ml，药液经上述方法处理后得到的稠膏为原料，取PVA(17～ 88)，滴加适量吐温-80与甘油，加入O.6g冰片，使溶，制得4cm×5cm 的膜40块。
2．2 含量测定
2．2．1 最大吸收波长的确定
取黄芩甙标准品10mg，用70％乙醇液配制成100ml标准品液，取1ml稀释至25ml，进行紫外扫描，λmax =277.6nm，故选择277.6nm为测定波长。
2．2．2 标准曲线的确定
分别吸取黄芩甙标准品液O.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4，4.5，5ml，用70％乙醇液定容至25ml，于277.6nm下测定各自的吸收度，处理后得到回归曲线方程：A=231.42C-0.0056(r=0.9996)。
2．2．3 样品的薄层色谱鉴别
取标准品液，样品液各5μl点于含2％CMC-Na硅胶GF254薄层板上，取盐酸小檗碱标准品，用70％乙醇配制成100m1标准品液，吸取5μl点于薄层板上；另按原药材比例，除去黄芩，按上述方法制得阴性对照液，5μl点样于同～ 薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10：7：5：3)上层液为展开剂，展开，取出，晾干，254nm紫外灯下观察 样品液色谱在与对照品色谱的相应位置上，显示2个暗色斑点，其中黄芩甙Rf=0.313。
2．2．4 样品液浓度的测定
从样品液中取20ml定容至100ml，1Oμl点样，点5个点于含2％CMC-Na硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-醋
酸-水(10：7：5 3)上层液为展开剂，展开，晾干，紫外灯下刮取黄芩甙斑点，70％ 乙醇定容至25玎l，浸泡数小时后，超声20min，过滤，滤液用7520-分光光度计在277.6nm下浏得吸收度，黄芩甙回归方程对照计算出此滤液中黄芩甙的含量，并进而计算得到样品液中黄芩甙浓度为0.1mg/ml，原药液中黄芩甙浓度为0.2mg/ml。此法加样回收率为1O1.7％ ，RSD为0.7％ 。
2．3 方法学的考察
2．3．1 样品稳定性考察
取样品液l0 点样，同法展开，刮板，70％ 乙醇同法洗脱，得洗脱液。于277.6nm处测定吸收度，间隔时间为1h，
结论：样品在8h内稳定。
2．3．2 精密度试验
按上述方法得到样品的70％ 乙醇洗脱液1份，于277.6nm处测定吸收度6次。X=0.074 SD=0.003l RSD=4.19％
2．3．3 重复性试验上述方法得到样品的70％乙醇洗脱液5份，于276nm处测定吸收度。
3 实验结果
实验测得每块膜(4cm x 5cm)中含黄芩甙0.5mg，而在制剂过程中，由于原药液的PH值为4.6，处于较稳定的范围内。所以，在此情况下，黄芩甙较稳定，含量较高。
4 结论
4．1 刮取黄芩甙对应斑点后，浸泡数小时后进行超声处理，洗脱量将大幅提高，有利于吸收度测定。
4．2 在实验中，对黄芩甙水溶液的稳定性进行了考察。结果：温度、加热时问都对黄芩甙的稳定性有影响，温度越高、加热时间越长，分解越多；另外，黄芩甙水溶液受PH值影响较大，PH值越大，稳定性越差，应尽量保持在4～6之间。
4．3 制膜过程中，由于稠膏在PVA(17～88)中分散，故两者混合后应充分分散至呈透明状，若膜不易揭起，可加入适量事先准备好的CMC-Na溶液。