水飞蓟含量测定方法（水飞蓟宾、异水飞蓟宾）

　　水飞蓟为菊科植物水飞蓟Silybum marianum（L.）Gaertn.的干燥成熟果实。2005版《中国药典》采用高效液相色谱法测定含量，以水飞蓟宾、异水飞蓟宾为指标成分。文献报道的含量测定方法主要为高效液相色谱法，薄层扫描法近些年已经很少用。
2005版《中国药典》水飞蓟含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（48：52：1）为流动相；检测波长为287nm。理论板数按水飞蓟宾或异水飞蓟宾峰计算应不低于5000。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.5克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加75%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。
文献报道的HPLC方法较多，常用的现具体举例如下：
杨晓云等采用HPLC法测定利加隆片中4种成分含量。采用LC-2010A高效液相色谱仪(日本岛津)；色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100×4mm，5μm)；流动相：混合溶液(75％0.05moL／L磷酸+18％甲醇+7％四氢呋喃)-甲醇梯度洗脱：
100／0（0～17min）→ 60／40（17～17．5min）→100／0；
柱温：50℃；流速：1.5 mL/min；检测波长288nm；理论塔板数按水飞蓟宾峰计算应不低于5000。水飞蓟宾在1.089～5.4481μg、异水飞蓟宾在0.325～1.624μg范围内呈良好线性关系。样品采用甲醇超声提取。
史向国等采用反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中水飞蓟宾的浓度。采用色谱柱为Kromasil c1B柱(5μm粒径，20Omm×4.6mm I. D．)，流动相为乙腈-甲醇-磷酸二氢胺缓冲液(体积比为24：24：50，pH=5)，检测波长为UV288nm。0.25～20.00mL范围内线性关系良好(r=0.9976)，日内，日间RSD分别≤5.99％和≤6.91％。
缪海均等采用反相高效液相色谱法测定人血浆中水飞蓟宾的浓度。采用 Bondapakcl H(300mm×4.6mm)色谱柱，甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液(pH 3.O)(29：20：51)为流动相， 以萘酚为内标，检测波长288 nm。水飞蓟宾在3.695～236.5ng/m1范围内线性相关(r=0.9998)，回收率为96.5％， 日内、日间RSD%均小于2.3%(n=3)。
也有以甲醇-水为流动相的。