灯盏细辛为菊科植物短葶飞蓬Erigeron breviscapus (Vant.) Hand.-Mazz.的干燥全草。2005版《中国药典》收载的含量测定方法,是以野黄芩苷为指标,采用高效液相色谱法来测定。
2005版《中国药典》灯盏细辛含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液(40:160)为流动相;检测波长为335nm。。理论板数按灯盏细辛峰计算应不低于5000。
供试品溶液的制备:取本品粗粉约0.5克,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷适量,加热回流至提取液无色,弃去三氯甲烷液,药渣挥去溶剂,连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,放置1小时,水浴中加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25ml,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
野黄芩苷的含量测定方法一般为HPLC法,前面在半枝莲的含量测定方法中已介绍过一些。现主要是介绍灯盏细辛及其制剂中野黄芩苷的含量测定方法。
朱会萍等用HPLC法测定了灯盏花素片中野黄芩苷含量。岛津LC-1OATVP溶液输送泵,岛津SPD-10AVP检测器,77251进样阀,浙江大学N2000数据工作站。以ODS-C18为固定相,甲醇-四氢呋喃-3%磷酸溶液(12:13:75)为流动相,UV检测波长为335nm。结果线性范围10~100μg/mL,r=0.9999,平均回收率99.5%,RSD为1.1%。样品采用甲醇超声处理。
张世轩等用HPLC法以黄芩苷为内标加校正因子测定灯盏花素注射液的主成分野黄芩苷(scutellarin)的含量。JASCO-900 HPLC仪(日本分光),Chrom king色谱工作站。Waters ODS C18柱(5μm,3.9×150mm);甲醇-水-冰醋酸(40:60:1)为流动相;335nm波长处检测野黄芩苷,加样回收率为99.76%,RSD小于2.0%,与外标法基本一致。
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