何首乌含量测定方法（2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷）

何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。2005版《中国药典》收载的含量测定方法为高效液相色谱法，测定其2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。文献报道的何首乌中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定都采用HPLC法。现对其具体方法作一介绍。
2005版《中国药典》何首乌含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相，检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过四号筛）约0.2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，加热回流30分钟，放冷，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，上清夜滤过，取续滤液，即得。
文献报道的HPLC法，其色谱条件基本上与药典相同，具体为：
①高效液相色谱仪：　岛津LC-2010A 高效液相色谱仪，UV-VIS紫外-可见检测器；Agilent 1100 HPLC( G1322A 脱气机、G1311A 四元泵、G1313A 自动进样仪、G1316A 柱温箱、G1314A VWD 检测器，Agilent Chemstation 色谱工作站)等。
②色谱柱: Hanbon Krom asilC18 (200mm×4.6mm，5μm )；Alltima C18 (250mm×4.6mm, 5μm)；Bondclone C18 (10μm，13.9mm×300mm) 等。
③柱温：35℃；25℃等。
④流动相：一般采用乙腈-水系统，也有加入甲醇调节极性。
⑤检测波长：一般为320nm。
⑥样品溶液的配置，一般比较简单，直接以不同浓度的乙醇为提取溶剂，采用超声或回流等方法提取，过滤后即可进样。