多茵灵与三环唑的HPLC分析

来源:作者:黄映君 摘要:用高效液相色谱法测定40％多菌灵·硫磺·三环唑悬浮剂中多菌灵和三环唑的含量。本方法在Sperisorb
ODS II柱上，采用甲醇+水(70+30)为流动相，检测波长为245nm的操作条件，并应用外标法进行定量检测。回收率均在98％～102％ 之间。 ．
关键词：多菌灵，三环唑，高效液相色谱法
40％多菌灵·硫磺·三环唑悬浮剂是由多菌灵、硫磺和三环唑3种有效成分经研磨分散在水中而成。本方法是通过大量试验摸索出来的，方法准确、可靠，与以前的GC方法比较，显得更快速、简便。
1实验部分
1．1试剂与溶液
甲醇：色谱纯；
冰乙酸：分析纯；
水：新蒸2次蒸馏水；
多菌灵标样：已知含量≥98％；
三环唑标样：已知含量≥93％。
1．2仪器
高效液相色谱仪：Waters 2487，具有紫外可变波
长检测器及B reeze系统的工作站；
色谱柱：Sperisorb ODS II色谱柱，4.6mm(id)X250mm ；
微量注射器：25μl；
超声波清洗器。
1．3操作条件
流动相：甲醇+水=70+30(v／v) ；
流量：1.0ml／min；
检测波长：245nm；
柱温：35℃；
进样量：20μl。
保留时间：三环唑：4.6min；多菌灵：6.2min。
1．4测定步骤
1．4．1标准溶液的制备
称取多菌灵标样O.075g(准确至O.0002g)于100ml容量瓶中，加入lml冰乙酸溶解，然后加入80ml甲醇，放于超声波清洗器中振荡5min，冷却后用甲醇稀释至刻度，摇匀。
称取三环唑标样O.04g(准确至O.0002g)于100ml容量瓶中，加入80ml甲醇溶解，放于超声波清洗器中振荡5min，冷却后用甲醇稀释至刻度，摇匀。
分别吸取上述溶液各1.00ml于25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。
1.4.2样品溶液的制备
将试样充分振荡混匀后，称取0.1g(准确至0.0002g)样品于100ml容量瓶中，加入1ml乙酸溶解，然后加入80ml甲醇，放于超声波清洗器中振荡5min，冷却后用甲醇稀释至刻度，摇匀。
吸取上述溶液1.00ml于5ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。
1．4．3测定
在选定的色谱条件下，待仪器基线稳定后，反复注入数针标准溶液，计算出各针相对响应值的重复性，待相邻两针的相对响应值变化小于2％，按照标准溶液、样品溶液、样品溶液、标准溶液的顺序进行液相色谱分析。
计算公式：X= A2·m1·P/5·A1·m2
式中：A1为相邻两针标准溶液中多菌灵(或三环唑)的峰面积的平均值
A2为相邻两针样品溶液中多菌灵(或三环唑)的峰面积的平均值
P为标准品的纯度(％)
ml，为称取标样的质量(mg)
m2为称取样品的质量(mg)
2结果与讨论
2．1检测波长的选择
在220～290nm波长范围内进行选择，发现在波长为245nm时，多菌灵和三环唑在紫外区的吸收都较大，而且干扰因素少，因而最终选定245nm作为检测波长。
2．2 流动相的选择
应用本方法对样品进行前处理时， 加入了少量的冰乙酸来溶解多菌灵。由于冰乙酸的存在。影响了多菌灵的峰形以及保留时间的稳定性，甚至有些色谱柱的分离结果显示出前后两针多菌灵的保留时间相差lmin。根据文献 的讨论，对于此种现象，可对流动相的选择进行调整。为此，对流动相的选择进行了多次的调整，最终确定在甲醇+水=70+30的色谱条件下可达到最佳分离效果。
2．3精密度测定
按上述条件和方法，对同一样品重复进样测定5次，可以得出多菌灵的标准偏差和变异系数(CV)分别是0.17和1.1 3％，三环唑的标准偏差和变异系数(CV)分别是0.17和2.08％。
2．4 回收率的测定
在已测定多菌灵和三环唑含量的样品中，加入一定量的多菌灵和三环唑标样，在相同的色谱条件和测定方法下测量其多菌灵和三环唑的含量，计算出回收率；多菌灵的回收率在98.9％～100.7％之间，而三环唑的回收率在99.6％～101.9％之间，结果是令人满意的。
3 结论
综上所述，用高效液相色谱法测定40％多菌灵·硫磺·三环唑悬浮剂中的多菌灵和三环唑，方法简便，重现性好，回收率理想，结果令人满意。