牛蒡子含量测定方法（牛蒡苷）

　　牛蒡子为菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实。2005版《中国药典》对其含量测定是采用高效液相色谱法，测的是牛蒡苷的含量。文献报道的牛蒡子及其制剂的含量测定方法大多为HPLC法。现介绍文献中常用的实验仪器、色谱条件等。
⑴2005版《中国药典》牛蒡子含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（1：1.1）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按牛蒡苷峰计算应不低于1500。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.5克，精密称定，置50ml量瓶中；加入甲醇约45ml，超声处理（功率150W，频率20kHz）20分钟，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
⑵文献报道的HPLC法
朱静等测定清热解毒复方抗流感病毒有效部位群中牛蒡子苷的含量。Walers高效液相色谱仪系统(Waters 515HPLC Pump，Waters 2478紫外检测器，Minnium软件系统)。色谱柱：YWG-Cl8分析柱(250mm×4.6mm，10μm)；流动相：乙腈：水(25：75)；流速：l.0mL／min；检测波长：28Onm；温度：室温。样品处理：以稀醇回流提取得干燥浸膏→上AB-8大孔树脂柱．水洗至无色，水洗液弃；再稀醇洗脱。
周雪梅等测定风热感冒颗粒中牛蒡子苷的含量。Waters 510液相色谱仪，Waters 486检测器，大连依利特工作站。色谱柱：C18柱(4.6mm×250mm，5μm)，北京迪马产品。流动相：甲醇-乙腈-磷酸三乙胺水溶液(20：15：65)。检测波长选择：279nm。流速：0.8ml／min。柱温40℃。理论塔板数按牛蒡子苷色谱峰计算应不低于5000。回归方程：y= 661464.70X-7984.4，r=0.9996。牛蒡子苷在0.12～0.73 μg范围内线性关系良好。
李士敏等采用固相萃取-高效液相色谱法分离测定利咽颗粒中的牛蒡子苷的含量。色谱柱为Waters ca 柱(25mm×4.6mm，5μm)柱前加预柱(2.5mm×4.6 mm)，流动相：乙腈-0.02％磷酸溶液(pH：2.85)(20：80)；柱温35℃；检测波长为228nm；流速1.0 mL/min。牛蒡子苷的平均绝对回收率为(90.16±1.45)％，RSD为1.61％；平均相对回收率(99.74±1.69)％ ，RSD为1.69％。样品处理：甲醇超声处理，取滤液移入经事先活化过的Sep-pak小柱上→依次加5mL甲醇、5mL水淋洗→水5mL，30％的甲醇溶液5mL过柱，弃去流出液→50％的甲醇溶液洗脱吸附在柱上的牛蒡子苷。
综上所述，采用HPLC法测定牛蒡子苷的含量，色谱条件除药典所载外，常用的流动相系统为乙腈-水、乙腈--磷酸溶液等，检测波长常用的为280nm，也有用228nm等。样品的处理上，一般对于药材比较简单，通常用适当溶剂处理即可；对于制剂，应成分复杂，处理比较麻烦，往往要经过过柱处理。