薄层扫描法测定舒心冲剂中盐酸小檗碱的含量研究

　　舒心冲剂，是由丹参、北沙参、黄柏等5味中药材经提取加工制成。具有活血化瘀，养阴益气，定悸除烦之功效。采用薄层色谱扫描法对黄柏中所含成分盐酸小檗碱进行荧光扫描的含量测定。
经方法学考察，方法的线性范围、精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验均良好，为该制剂质量分析建立了可靠的质量控制方法。
1 仪器与试剂
　岛津CS-930薄层扫描仪、S10200A型超声波清洗器、盐酸小檗碱对照品由中国生物制品检定所提供。所用试剂氯仿、甲醇苯、醋酸乙酯、异丙醇均为分析纯。薄层层析用硅胶G(60型)中国青岛海洋化工集团公司生产。
　 2 方法与结果
2．1 层析与色谱条件 薄层板为硅胶G板，板厚0.5mm，110℃ 活化30min，室温24～28℃，相对湿度56％～72％。展开剂：苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(20：10：5：5：1)，浓氨试液预平衡15min，薄层板同时预平衡。上行展开。
2．2 线性范围考察 精密称取盐酸小檗碱对照品(批号：0713—9906)10，01mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL置lOmL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成每1mL中含0.04004mg的溶液。
精密吸取0.5、1、2、4、8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以前述色谱条件操作。测定对照品荧光强度的积分值，经线性回归，回归方程：Y=56922.79X+107.45，r=0.9999。
由此可见，盐酸小檗碱点样量在0.2002～0.32μg范围内线性关系良好。
2．3 供试品溶液的制备取本品5袋，研细，取粉末约1Og，精密称定，加水25mL，超声3～5min，用浓氨试液调pH值9～10，用氯仿提取5次(30、30、30、20、20mL)合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2．4 精密度试验考察 取批号为200103的供试品，按正文项下方法操作，同法连续扫描5个点，测定结果RSD为0.90％。
2．5 稳定性实验考察 精密吸取供试液5μl，按0、1、2、3、4、5h的时间间隔，分别测定荧光强度积分值，结果显示，5h内测定荧光强度积分值无明显变化，RSD为1.2％。供试品中盐酸小檗碱的化学性质稳定。
2．6 样品含量的测定取相同批号的样品5批，按供试品溶液制备方法制备成供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.04mg的溶液。作为对照品溶液。
精密吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(20：10：5：5：1)为展开剂，以浓氨试液预平衡15min(薄层板同时预平衡)。样品含量测定结果：每袋分别为0.1036mg、0.1022mg、0.1048mg、0.1046mg、0.1029mg。
2．7 回收率试验 取已知准确含量的样品(批号：200103含量为0.008706mg／g)约5g，精密称定，加水25mL，超声处理5min，精密加入盐酸小檗碱对照品溶液(0.04004mg／g)1.2mL，按含量测定方法项下操作，测定结果为 x=102.42(n=5)，RSD为0.91％。
3 讨论
本试验在供试品溶液制备方法考察中。根据盐酸小檗碱的溶解性质，本试验曾以盐酸-甲醇溶液(1：100)为提取溶媒，60℃水浴加热15min，超声处理30min，加甲醇定容，滤过，取续滤液作为供试品的溶液，此方法取样量相对较少，但供试品薄层色谱有背景干扰，后改用正文中供试品溶液制备方法，以水溶解，碱化后用氯仿提取，减少杂质干扰，极大地提高了色谱的清晰度，在选定的薄层色谱条件下，盐酸小檗碱斑点与供试品中其它组分的斑点得到良好的基线分离，分离度达到了中国药典2000年版规定的要求。