近十几年来，有关丁公藤及其制剂、东莨菪碱内酯的含量测定方法报道较少，且多为单方制剂和药材，方法一般都为2005版药典所载HPLC法，也有用薄层扫描法的。现介绍HPLC法所采用的仪器、色谱柱（最常用）以及其它含量测定方法。
一、高效液相色谱法（HPLC）
⑴ 2005版药典丁公藤含量测定项：
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（32：68：0.16）为流动相；检测波长为298nm。理论板数按东莨菪碱内酯峰计算应不得低于2000。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过4号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，加热回流6小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25 ml，置烧瓶中，浓缩至约1ml，加3mol/L盐酸溶液10ml，水浴中水解2小时，立即冷却，移入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，并入分液漏斗中，加氯化钠2g，用三氯甲烷强力振摇提取5次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠2g，搅拌，滤过，滤液合并，70℃以下浓缩至近干，立即加入甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。
⑵ Waters 510高效液相色谱仪；Waters 486紫外检测器；Waters PC 800色谱工作站；Agilent 1100高效液相色谱仪；G1315B DAD检测器；化学工作站；UV530紫外分光光度计。Hypersil C18柱(4．6×200 mm，5μm 大连依利特公司)。其余同⑴。
⑶ 美国Agilent 1100 高效液相色谱仪。包括( 1312,X二元泵，G1313A自动进样器，GI316A恒温箱，( l314A、VCI)紫外检测器色谱柱：Shim-pack CI C—ODS件(6mm×150mm,5μm)，流动相：甲醇-0．05%磷酸(39：61)，柱温：25℃，检测波长：345nm。其余同⑴。
⑷ LC-1OAT 高效液相色谱仪(日本岛津)；N2000在线色谱工作站(浙江大学)；Hypersil．ODS2(150 mm×4．6 mm，5μm)色谱柱(大连物理所)，检测波长：347nm。其余同⑴。
⑸丁公藤及其制剂的含量测定文献中对东莨菪内酯的高效液相色谱法也有报道，但多为单方制剂和药材，复方制剂的反相高效液相色谱法很少。2004年章红等采用HPLC法测定冯了性药酒中东莨菪内酯的含量。HP1100高效液相色谱仪，包括VWD可变波长检测器，HP1100化学工作站。色谱柱：phenomenex C18柱(150mm×4．6 mm，5μm)，流动相为：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(14：86)，检测波长：345nm。样品处理：盐酸溶液水解、氯仿萃取。
⑹孙静芸等测定不同来源桑白皮东莨菪内酯含量：岛津LC-10ATVP 高效液相色谱仪；SPD-10AVP紫外检测器；岛津UV-265型紫外分光光度仪；HS 色谱工作站；色谱柱Shim-PackVP-ODS (150 mm ×4．6 mm)。样品处理：30%乙醇提取，氯仿萃取，未经盐酸水解；检测波长：345nm。
⑺2005奶奶苏薇薇等采用高效液相色谱法测定水母雪莲中东茛菪内酯的含量：DIONEX 高效液相色谱仪(ASI-100自动进样器、ATH-585柱温箱、P680四元梯度泵、PDA-100检测器)；Merck Lichrospher100 RP-18e色谱柱(250mm×4.0 mm，5μm)；以甲醇-四氢呋喃-水溶液(四氢呋喃：水V／V=l：12，用醋酸调pH至3.0)为流动相，梯度洗脱。时间：0-8-13-33-43min，甲醇：36％-36％-60%-100％，四氢呋喃水溶液：64％-64％-40％-0％-0％。样品处理：直接用甲醇超声提取。
二、薄层扫描法
2005年郑清瑗等以薄层扫描法测定薄层扫描法测定欧德活脑素胶囊中枸杞子的东莨菪内酯的含量。仪器：CAMAG TLC SCANNER 3(瑞士卡玛公司)，计算机系统及WIN CATS软件(瑞士卡玛公司) ，采用硅胶G薄层板，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲酸(3：4：1.5：0.5)为展开剂，展开，10％氢氧化钾乙醇溶液为显色剂。激发波长 ：366nm，滤光片K 400，进行荧光方式扫描，测定。样品处理：盐酸水解、氯仿萃取，上硅胶柱，收集醋酸乙酯洗脱液。因东莨菪内酯具香豆素类结构，其色谱斑点本身具有荧光，但放置后斑点的荧光消失较快，不稳定。在测定稳定性时，发现随时间的推移，荧光强度有所下降，因此将展开后的薄层板放置约5min，挥去展开剂，立即喷以10％ KOH乙醇溶液。
何清等采用双波长扫描法测定复方羊角胶囊中东莨菪内酯的含量：采用高效硅胶G薄层色谱板，以氯仿-丙酮-甲苯-冰醋酸(9 ：0.5：0.5：ld)为展开剂，双波长反射法锯齿扫描测定λs=345nm， λR=265nm，CS-9000型双波长薄层扫描仪(日本岛津) 样品处理：甲醇提取。
由以上结果可知，无论是丁公藤及其制剂，还是东莨菪碱内酯的含量测定方法，文献报道较多的是HPLC法，色谱条件多为2005版药典所载。薄层扫描法应用较少，且样品前处理较麻烦，东莨菪内酯显色后荧光稳定性较差，不如HPLC法稳定，操作也简单。
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