头孢哌酮钠中聚合物含量测定的方法学考察

摘要：考察了头孢哌酮钠中测定聚合物含量的方法。
关键词：头孢哌酮钠；聚合物含量测定；葡聚糖凝胶色谱
头孢哌酮钠是抗生素类药，临床以静脉滴注给药，其质量标准要求较高，其中聚合物测定是一主要项目。现版《中国药典》规定头孢哌酮钠中聚合物的限度不得大于O.4％，注射用头孢哌酮钠不得过0.8％。以葡聚糖凝胶色谱法测定，此方法使用欠广泛，有的厂家使用过程中感到较生疏，不易掌握和重复性差。现就其方法学进行考察，认为只要掌握分离原理，正确运用凝胶色谱特性，是可以得到良好效果的。
1 仪器与试剂
精密分析天平(AG 245，梅特勒公司)；高分子杂质检测器BP-9300B(北京捷通新技术公司)；数显恒流泵BT-100B(上海沪西分析仪器厂)；C-R6A色谱数据处理机(日本岛津制作所)；凝胶色谱柱(16×700mm，上海锦华层析设备厂)。
头孢哌酮对照品(纯度94.4％，中国药品生物制品检定所)；头孢哌酮钠样品(苏州东瑞制药有限公司，批号0206218A、0206213A)；磷酸氢二钠、磷酸二氢钠(上海新华化工厂，均AR级)。
2 方法学验证
2．1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱以葡聚糖凝胶G-10(40～120μm)为填充剂，玻璃柱内径1.6cm，柱高70cm；流动相A为0.01mol／L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水1000ml溶解，调节pH值至7.0)；流动相B为0.01％十二烷基硫酸钠溶液，临用新配；流量为每分钟3.0ml(规定值为1.0 m1)；检测波长为254nm。
以流动相A为流动相，用蓝色葡聚糖2000，1mg/ml溶液进样200μl进行测定，理论板数以蓝色葡聚糖2O00峰计算，3次测定值分别为1859、1997、1925，平均值为1927(规定值为700)。拖尾因子3次测定值分别为1.03、0.99、1.01(规定值为0.75～1.5)，重复进样精密度为2.84(规定值应小于5％)。
2．2 最小检测限，最低检测量
精密称取本品202.12mg，加流动相A溶解并稀释至250ml，浓度为0.8085mg/ml，进样200μl时有明晰的色谱峰。可认为最小检测限为0.8085 mg/ml，最低检测量为0.8085 mg/ml×200μl=161.7μg。
2．3 样品测定
2．3．1 样品、对照品溶液的配制精密称取头孢哌酮约500mg，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(临用新配)。
精密称取头孢哌酮对照品25.65mg，置250ml量瓶中，加水20ml，超声处理使溶解，放至室温，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
2．3．2 测定 对照溶液的进样精密度试验：分别取对照品溶液，以流动相B为流动相，连续进样3次，测得校正因子为9.07×10-6、8.85×10-6和9.37×1O-6，平均值为9.1×10-6，RSD为2.84％。
样品溶液测定的重复性试验：分别精密称取头孢哌酮500mg，共6份，以流动相A为流动相进行测定，以头孢哌酮计，含头孢哌酮聚合物含量分别为0.18％、0.17％、0.17％、0.17％、0.17％和0.18％，RSD为3.O％。
2．4 测定结果
测定了多批样品，聚合物含量均低于限度，样品的色谱图。
2．5 样品的加速试验
将本品在60℃条件下放置10d后，进行测定，聚合物含量明显高于零天时的产品，约为O.55％，提示本品对温度敏感，应于冷处放置。
3 小结与讨论实验结果其理论板数、拖尾因子、进样精密度等均优于有关规定。采用耐中压的封闭玻璃柱，加大了凝胶用量，使聚合物与头孢哌酮有较好的分离效果，理论板数接近2000，RSD为2.84。由于柱耐压可提高洗脱流量，达到3.0ml/min节省了时间。