猪链球菌2型感染猪和人的现状及研究进展

摘　要：猪链球菌2型可引起人和猪的感染，甚至死亡，是一种严重的人兽共患病病原，其引起的疫病在我国被列为二类疫病。它能引起仔猪脑膜炎、支气管肺炎、败血症、关节炎及人的化脓性关节炎、眼内炎和心内膜炎等。在世界上许多国家和地区广泛分布，已发现的致病因子有十多种，但致病机理尚未彻底阐明。由于该菌引起的疫病危害性大，所以对该菌的快速诊断检测和防治方法也在不断改进。论文对猪链球菌2型病的流行状况、致病性、检测方法、防治等研究现状进行综述。

关键词：猪链球菌2型；感染；人类；猪

猪链球菌(Streptococcussuis)属于兰氏D群链球菌，根据菌体荚膜多糖抗原性不同，被分为35个血清型，即1型～34型和1/2型，其中以2型流行最广。猪链球菌2型(Streptococcussuis type2)又称猪链球菌血清2型或荚膜2型(有称人-猪链球菌2型、血液链球菌2型)，是一种严重的人兽共患病病原菌。该菌引起的病不仅给养猪业造成很大的威胁，而且危害着公共卫生安全，已引起兽医界与医学界的高度重视。1　流行状况

猪链球菌2型感染猪导致的疾病广泛发生于各养猪业发达国家，1954年英国首先从暴发败血症、脑膜炎和关节炎的乳猪中分离获得，随后澳大利亚、美国、丹麦、日本、泰国、新加坡、加拿大等国也有报道。1968年丹麦学者首次报道了人体感染猪链球菌导致脑膜炎的病例，全球已有200余例人感染猪链球菌的报告病例。近几年，我国对猪链球菌2型研究报道也逐渐增多。如1998年－1999年江苏省某地部分猪场暴发该病，数万头生猪死亡，还引起25例人感染发病，死亡14例。2005年7月四川省9个地市26个县区先后暴发猪链球菌2型病，生猪因发病死亡的同时，与病猪有密切接触的人群感染猪链球菌病的病例报告有206例，死亡38例。从国内现有报道来看，我国猪链球菌2型流行存在两个方面：一是发病范围广，涉及全国11个省(直辖市、区)，并且有多起报道；二是发病原因复杂，形式多样，如当地同时出现人和猪感染的病例，也有只有报道人发病而未出现动物疫情的，还有猪发病而未见人感染的病例。所以对于该病的流行方式、范围和致病机理需要进一步研究，以减少疫病流行的危害和降低损失。

2　致病性研究

2.1　致病因子的研究

猪链球菌2型的致病性与其毒力因子密切相关，对这些致病因子之间的相互作用机制的研究和了解将有助于该病的防治。已报道的毒力因子有11种之多，包括荚膜多糖(capsularpolysaccharide， CPS)、溶菌酶释放蛋白(muramidase released protein，MRP)、细胞外蛋白因子(extracellular factor， EF)、溶血素(suilysin)、44ku蛋白、IgG结合蛋白和纤毛黏着素(adhesin)、转录调节子、氨基酸通透酶、ABC转运子和表面锚定蛋白等。

Windsor RS依据传统观念提出荚膜多糖是猪链球菌2型的侵袭力因子。研究证明荚膜多糖在猪体内能产生有调理活性的抗体，并可用弗氏不完全佐剂来提高其免疫原性。VechtU等对180株猪链球菌2型菌株分析表明，自病猪分离到的菌株含两种蛋白质，一种为MRP，另一种为EF，免疫印迹显示MRP和EF有很强的免疫原性，用MRP＋和MRP－两株猪链球菌2型菌株分别感染SPF猪，比较两者在致病性上存在差异，认为MRP和EF与猪链球菌2型的致病力有关。曾巧英等从MRP的黏附作用、诱导血管内皮细胞融合和凋亡作用，用单克隆抗体展示了猪链球菌2型MRP在菌体表面的形态与分布等方面作了大量工作，为MRP的致病作用研究提供了依据。但是从病猪和病人分离到的菌株有11%没有MRP和EF，提示可能还有其他因子与该菌的致病力有关。另外该菌产生的一种溶血素蛋白与猪链球菌溶血素O有较高的同源性，即猪链球菌溶血素，又称为猪溶素。通过Balb/c小鼠和猪链球菌2型溶血素的免疫保护试验提示猪链球菌溶血素是一种保护性抗原，说明猪溶素是一种重要的致病因子。猪溶素可能在猪链球菌侵入和裂解细胞的过程中发挥着重要作用。

猪链球菌2型含有89 ku、94 ku两种片段蛋白质，与其致病性有关，其中94 ku有免疫原性，可做亚单位疫苗。用免疫斑点试验证明94ku蛋白质有强免疫原性，可能是猪链球菌2型的致病因子。田云等采用抑制性差减杂交方法获得了猪链球菌2型5个可能的新毒力基因片段，分别是转录调节子、氨基酸通透酶、ABC转运子及表面锚定蛋白。

对于上述毒力因子是单独作用还是共同作用，哪种因子在致病机理中起主导作用，是否还有别的未发现因子在起作用，以上诸多问题都值得深入研究。

2.2　所致疾病

猪链球菌2型在猪群中主要是通过空气传播，主要引起断奶仔猪的关节炎、脑膜炎、支气管炎、急性败血症和急性死亡。但不同表型的链球菌2型致病性不尽相同，据报道，我国江苏省正常猪群中链球菌2型的带菌率很高，非疫区猪群平均带菌率为42%，疫区平均为39%，带菌广泛存在于猪的呼吸道中，妊娠母猪的子宫和阴道中可带病菌，其产下的仔猪在出生后常发生感染。

人感染猪链球菌的途径主要是接触病死猪，致病菌经破损皮肤和黏膜侵入；或食入未煮熟的病死猪肉而感染。人类感染猪链球菌多为亚临床感染，发生临床病例非常少见。RobertsonID等建立了测定猪链球菌2型抗体的ELISA方法，在新西兰，对兽医学生、农夫、肉品监督员和养猪者进行检测，发现猪链球菌2型抗体阳性率分别为0%、9%、10%和21%。可见，抗体的产生不仅说明隐性感染的发生，而且与猪或猪肉制品的职业接触有关。人体感染猪链球菌后，视细菌侵入部位而有不同的临床表现。多数病例发病初期均出现高热、全身不适，眩晕。临床上主要分为2个类型，即败血症型和脑膜炎型。另外，猪链球菌还可侵入人体的关节、眼睛和心脏等，引起化脓性关节炎，眼内炎，心内膜炎和休克等。

3　检测方法

猪链球菌2型可根据形态、培养特性和API20Strep生化鉴定系统初步鉴定，但这些方法只能鉴定到种。通过血清学鉴定可确定血清型，实验室常用分型诊断血清进行乳胶或玻片凝集试验。也有报道用核糖体分型法可鉴定有毒力猪链球菌2型。酶联免疫吸附法(ELISA)也被用于猪链球菌的血清学鉴定。荷兰学者根据猪链球菌2型的两种毒力因子MRP和EF建立了双抗夹心ELISA法(doubleantibody sandwich-ELISA，DAS-ELISA)。陈兴扶等根据猪链球菌荚膜多糖抗原，用ELISA方法检测相应的血清抗体，特异性强。

猪链球菌2型感染引起的发病往往较快，因此建立快速、准确、简便的诊断方法就成为人们研究的热点。国内外学者就猪链球菌2型的快速诊断方法做了大量研究，他们根据菌株的不同毒力基因建立了多种PCR。但由于猪链球菌2型存在不同的菌株，其所携带的毒力因子也不尽相同，因此普通的PCR检测方法对猪链球菌2型有漏检的可能。刘军等以编码CPS、EF和MRP的基因为靶基因设计4对引物，建立了检测猪链球菌2型和9型菌株的多重PCR反应体系，该反应体系具有高度的特异性和敏感性，是猪链球菌2型菌株的一种快速、特异且敏感的检测方法。马清霞等建立的猪链球菌2型多重PCR检测方法，能够同时检测猪链球菌2型CPS及其重要毒力因子MRP和EF。陈博文等建立了一种快速检测猪链球菌2型的多重荧光PCR方法，该方法快速、特异性强，灵敏度高，稳定性好，适合于大批量样品的检验，可用于疫情监测。随着人们对猪链球菌2型的认识逐渐深入，对其检测方法也在不断的改进和创新。

4　防治研究

4.1　灭活疫苗研究

对于猪链球菌2型的防治以防为主，到目前为止还没有人与人之间传染的病例出现，所以人类预防的重点为生猪。本病的灭活苗、弱毒苗和亚单位保护性抗原在一些国家已做了研究，表现的免疫效果极为不同，目前还未研制出人用链球菌疫苗。在此将着重介绍国内对全菌灭活疫苗在养猪业上的相关研究。

为了检验疫苗效力，必须建立适合猪链球菌2型菌株的动物模型。王继春等选择了不同来源的猪链球菌2型菌株，对多种实验动物进行了致病性试验，结果显示Balb/c小鼠可用于该病疫苗免疫试验的动物模型；此后，王建等建立了用仔猪作为该病的模型，这都为研究猪链球菌2型菌株奠定了基础。

菌株的培养稳定是作为疫苗种毒株的必要条件。倪艳秀等对猪链球菌2型制苗候选菌株的2株细菌进行试验，并分别检测不同代次菌株的菌落及细菌形态、生化特性、溶菌酶释放蛋白和胞外因子等指标。结果表明，2株细菌的培养稳定性较好，使用限定代次至少可达41代，可作为理想的疫苗生产菌株。

开发一种疫苗是否可行，一般是通过检测候选疫苗免疫抗体水平和攻毒保护试验来研究。刘佩红等采用琼脂免疫扩散、间接酶联免疫吸附试验检测猪链球菌氢氧化铝二联灭活疫苗免疫猪的抗体水平。通过免疫抗体与攻毒保护相关性测试，抗体效价在1∶800及以上都能抵抗1×107cfu马腺疫链球菌兽疫亚种和1×108cfu猪链球菌2型的强毒攻击，揭示猪链球菌氢氧化铝二联灭活疫苗对预防猪链球菌2型病是可行的。王建等通过动物试验，用毒力强、免疫原性好的2株细菌，对其培养特性进行了研究。以上述生产菌株制备得到的氢氧化铝胶二联灭活疫苗，接种仔猪，在一定时间内进行攻毒保护试验和抗体消长规律的测定显示，制备的猪链球菌病二联灭活苗具有良好的免疫保护作用，这进一步证明了用猪链球菌病二联灭活苗免疫的可行性。

由于猪链球菌2型的致病性较强，疫苗生产要求的条件很严格，特别是生物安全方面存在一定的风险性，所以我国农业部在保证生物安全的前提下，确立了猪链球菌2型灭活疫苗生产厂家。首批猪用猪链球菌2型灭活疫苗已于2005年7月出厂，这对我国预防猪链球菌2型引起的疫病起到了积极作用。

国外有学者采用将猪群暴露于猪链球菌2型菌下，进行人为控制，以控制该病；或在小范围内进行疫苗研制试用，未见有大规模疫苗生产的报道。

当然，除了在养殖时以加强疫苗免疫为主的预防措施外，还需要对从业人员进行宣传教育，按照农业和卫生部门的有关规定进行防范。同时养殖户要加强饲养管理，才能达到“预防为主，防重于治”的目标，以减少疫病发生的风险。

4.2　治疗

治疗本病的方法报道较多，对于发病猪，一般不采取治疗的方法，而是按照兽医部门《猪链球菌病应急防治技术规范》的要求，进行不放血扑杀处理，而对于同群猪立即进行强制免疫接种或用药物预防，并隔离观察14d，必要时对同群猪进行扑杀处理。

对于人感染猪链球菌2型患者的治疗，一般采取的治疗原则为通过药敏试验，筛选出敏感药物，进行早期足量有效的抗生素治疗。根据病情纠正酸中毒、使用升压药以及激素等抗休克治疗。用丹参、低分子右旋糖酐抗凝，改善微循环。脑水肿病人给予脱水剂及其他对症处理等。