1 试验材料
1.1 药物与试剂黄金口服液的药物来源于市医药材供应站,方剂由黄连、黄芩、金银花、北柴胡、板蓝根、甘草组成。加常水煎煮二次,用4层消毒沙布过滤,备用,浓度为1g生药/1ml;阿司匹林(焦作化学制药厂生产,批号0004172);盐酸左旋咪唑(西南制药厂生产,批号030701);消炎痛(安徽淮南第三制药厂生产,批号040602);新配制的15%鲜酵母混合液,20%新鲜鸡蛋清溶液;5%鸡红细胞混悬液;4%ciemas?wrighe溶液;1∶1丙酮?甲醛固定液。菌种:绿脓杆菌R1?5,痢疾杆菌51575,伤寒杆菌50096,大肠杆菌H99?34485,金黄色葡萄球菌26001等。?
1.2 实验动物 由市医专提供,健康大鼠体重220±20 g,健康小鼠体重2±2g,雌雄各1/2。饲养观察二周的体温、脉搏、呼吸、食欲、精神、大小便正常确定为本试验使用。?
2 方法与结果 ?
2.1 实验室体外抑菌试验自制新鲜牛肉汤膏为培养基将药液分别稀释成2、4、8、16、32、64倍,将菌种分别接种于各组药液中,在37℃的条件下培养24h;再将培养的各种细菌分别划线接种于无菌固体培养基中,培养24 h,取出培养基观察细菌生长情况。
结果见表1。
表1 黄金口服液的抗菌作用
菌种 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64
黄金色葡萄球菌 - - - - - +
巴氏杆菌 - - - +* + +
伤寒杆菌 - - - - + +
痢疾杆菌 - - - - + +
大肠杆菌 - - - - - +
注:“-”不生长,“+”生长。
结果表明:该口服液对5种菌均不同程度的抑制作用。 ?
2.2 对大鼠酵母所致发热的影响取大鼠30只,雌雄各1/2,随机分为5组。按表2中剂量分别灌5天,测肛温1次/天。于第5天试验前测肛温2次/天(2次间隔1h),以其平均值作为正常值,给各鼠颈部皮下注射所配制的15%新鲜酵母混悬液2 ml/?100 g。4h后给各鼠灌药,测量给药后1、3、5、7 h的肛温,以其与正常值之间的差值作为给药后不同时间的肛温变化值。结果见表2。?
结果证明:该口服液10 g/kg,5 g/kg剂量对酵母所致的大鼠体温升高有显著的抑制作用。
表2 黄金口服液对大鼠鲜酵母所致发热的影响
药物及剂量 动物 给药前 给药后不同时间的体温变化(℃.±S)
数(只)体温(℃) 1 h 3 h 5 h 7 h
生理盐水 6 37.6±0.18 1.85±0.27 2.45±0.33 2.72±0.28 2.83±0.35
黄金口服液10g/kg 6 37.6±0.31 1.28±0.42* 1.70±0.56 * 2.23±0.48 2.08±0.55
黄金口服液5g/kg 6 37.9±0.47 1.50±0.57 1.90±0.35 2.23±0
.52 2.16±0.36
黄金口服液2.5g/kg 6 37.5±0.41 1.68±0.45 2.47±0.23 2.68
±0.31 2.57±0.30
阿司匹林100mg 6 37.4±0.16 1.16±0.16* *1.28+0
.36** 2.16±0.36 2.00±0.14**?
*?P<0.05 **P<0.01
2.3黄金口服液对大鼠蛋清性足肿胀的影响;取大鼠30只。随机分为5组,按表3中剂量分别灌服药3天,用窄带软尺测量每只大鼠致炎前后足踝关节周径作为正常值。于最后一次给药1h后,给各只鼠0.1 ml/只,致炎,分别致炎后30 min、1 h、2 h、4h测量各只鼠右足裸关节周径,以其与正常值之间的差值作肿胀度指标。结果见表3。?
结果表明:黄金口服液对蛋清性大鼠足肿胀有非常显著的抑制作用。后右足距皮下注射新配制的20%新鲜鸡蛋清溶液
2.4 黄金口服液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取小鼠50只,雌雄各1/2,随机分为5组,按表4中剂量分别连续灌药12天,于最后一次给药液1h后,分别与小鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液(1 000 r/min离心3次,10 min/次,至红细胞积压恒定,按此积压体积用生理
盐水配制成5%混悬液) 0.5 ml/只。10 h后,颈椎脱臼处死,按文献方法剪开腹腔,注入生理盐水2 ml,抖动腹部,取腹腔洗液1ml,滴涂于载玻片上,每片0.2 ml,共2片,用生理盐水漂洗,凉干,1∶1丙酮?甲醛溶液固定5min,4%ciemas?wright溶液染色3min,蒸馏水漂洗,凉干,在油镜下计巨噬细胞数100个,由以下公式计算巨噬百分率及巨噬指数。结果见表4。
巨噬百分率(%)=SX(鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞)×100
吞噬指数(%)=SX(鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞)×100
表3 黄金口服液对大鼠蛋清性足肿胀的影响
药物及剂量 动物数? 给药后不同时间的体温变化(℃.±S)
(只) 0.5 h 1 h 2 h 4 h
生理盐水 7 0.443±0.053 0.443±0.053 0.375±0.33 0.229±0.069
黄金口服液10g/kg 7 0.249±0.079** 0.153±0.053
** 0.043±0.56** 0.014±0.038**
黄金口服液5g/kg 7 0.271±0.049** 1.570±0.053** 0.100±0.35**0.014±0.018**
黄金口服液2.5g/kg 70.343±0.053**0.243±0.079**?0.186±0.23**0.100±0.082**消炎痛20mg 70.171±0.076**?0.086±0.069** 1.28+0.029** 0.014±0.38**
**?P<0.01
表4 黄金口服液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
药物及剂量 动物数(只) 巨噬百分率(%) 吞噬指数
生理盐水 10 16.6±3.23 23.1±4.63
黄金口服液14.8g/kg 10 31.0±7.09**? 55.3±14.26
**?
黄金口服液7.41g/kg 10 25.3±4.45**? 35.7±9.99**?
黄金口服液3.718g/kg 10 19.7±6.09**? 33.2±8.11**?
盐酸左旋咪唑12.5g/kg 10 39.2±6.81**? 58.2±16.40
**
* *?P<0.01
结果表明:黄金口服液能明显增加正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,具有提高机体非特异性免疫功能的作用。?
3 小结 ?
通过实验室药理试验表明,黄金口服液对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均有一定的抑制作用,能显著抑制酵母所致的大鼠体温升高,对大鼠蛋清性足肿胀有非常显著的抑制作用,并对机体免疫机能有一定的增强作用,能提高机体对疾病的抵抗力。
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