第三节 精液的收集和处理
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人工授精和本交的一个最基本的区别在于人工授精技术员要负责更多的配种工作,人工授精技术员必须围绕保持精子活力而为精液提供处理和存放条件,同时,人工授精技术员还应了解精液的生产过程,以便能尽可能地在人工授精实验室模拟。
精子在公猪睾丸形成并存储于附睾,两者准确地控制精子的环境来保持精子活力。温度不要急剧变化,并要为精子提供新鲜养分,这点十分重要,因为精子对温度急变很敏感且代谢率高,这就意味着需要及时的能量供应,睾丸和附睾是存储精子的最好环境。
同样地,母猪生殖道的环境也被准确地控制。在本交中,精子在几分钟内就离开附睾而进入母猪生殖道,因此,本交中精子是由一个最佳环境而直接进入另一个最佳环境。
人工授精采精时,要负责为精子提供合适的存放环境。记住最重要的一点是避免温度应激,必须将精液采集到经预热后的、能保温隔热的容器中,以便保持精液温度,当加入稀释液或其他液体时,要确保其温差在10C(20F)以内。
一 精液稀释液的目的
多数精液稀释液含有缓冲液(即柠檬酸钠)和营养物质(果糖),缓冲液用于避免PH的改变,精液中的营养物质可被精子应用。记住稀释后的精液生存期较短,渐渐地,精子会消耗稀释液中的所有养分并且产生废物,因此,精液存放时间越长,其受精力越低。
二 采精所需设施
从事人工授精的人员要考虑相应设施的采购,所需设施因其操作不同而不同。明显地,希望经常采用人工授精的猪场,其设备投资就比只在特殊情况下才采用人工授精的猪场的投资要大得多,人工授精的最低设备需求是:
? 集精瓶:各种不同的容器可用于采精,但重要的是要能保温隔热、能被消毒或抛丢,可用大颈保温瓶(图1)。
? 6”塑料漏斗。
? 牛奶过滤器或消毒外科纱布。
? 一次性乳胶手套。注意:有些品牌的手套对精子有毒,要仔细选择。
? 显微镜:不同的人对显微镜的质量要求不同,但显微镜需要有完整的光源,其放大倍数可为100、400和1000倍(油镜),最好有两个目镜(特别当你经常使用显微镜来检查精子形态时就特别有用),此外,还需要显微镜保温箱,使精液样本保持在同一温度。
? 载玻片和滴管。
? 500ml的量筒。
? 2只12”的温度计。
? 1~5升的瓶子(玻璃或塑料),用于准备稀释液、稀释精液以及将精液分装到输精瓶。
? 输精瓶和管嘴。
? 精液保存设施:
-聚氯乙烯箱或聚苯乙烯泡沫冷臧箱,用于精液的短时间存放。
-恒温控制柜或保温箱。
? 输精导管和其他设备的消毒设施:
-消毒盘或电热网。
-电热输精导管消毒器。
-高压消毒锅。
? 输精导管:可重复使用的橡胶输精导管或其一次性品牌。
? 蒸馏水或反渗透水:注意这点很重要,水质差会降低所存放的精子的活力。
? 1个保温柜:用来干燥和存放所有采精和检测设备,有些单位将整个实验室保持在350C(950F),这在小型操作中是最好的。
图1 收集精液用消毒纱布和聚苯乙烯杯
三 最理想的设备
? 水软化器:这在硬水地区特别有用,尽管软化后的水质仍不能满足精液稀释的要求,但可用于清洗和消毒人工授精设备。
? 比色计或分光光度计:这些设备用于测定样本中精子数量(即精子密度或精子计数),利用这些资料就可更为准确地稀释精液且可能生产出更多的输精头份,然而,这些设备很昂贵,使用前还要校准,通常只适用于大型的商业化的人工授精实验室。
? 水浴恒温箱:用于控制稀释液的温度。
? 热盘:用于预热和准备显微镜载玻片和有关设备。
? 伊红苯胺黑染色法:用于死活精子的形态检查。
? 加热器/磁力搅拌器:用于准备更为复杂的稀释液。
四 采精准备
精子对温度(?20C)、渗透压以及杂质的细小变化都很敏感,正因为如此,用于精液处理的所有设备都应该清洁、温暖、干燥。
准备采精设备:将集精管、塑料包、过滤器等放入大颈烧瓶或聚氯乙烯容器(图1),过滤器应是牛奶过滤器或消毒纱布。
(一)采精室
公猪是很危险的动物,管理时也必须把它当成危险的动物对待,当经常同公猪接触时,管理人员对公猪的管理往往掉以轻心,因此,在修建采精室时,要考虑到人员和公猪的安全。(见图2)
图2 采精室
将猪赶到单独的采精室,而不是在公猪圈内操作,最好让公猪在假母猪上工作而不是在发情母猪上工作。如果按标准的规程来操作就容易找出出现的问题,进而改进采精操作。
建议采精室应设计为:
? 采精面积大约为10×10英尺(3×3m)。
? 应在四周用直径为4英寸(1.6cm)的钢管来制做保护栏,其高度为0.75m,其间隔为0.3m。
-保护栏应距采精室的墙壁0.6~0.9m远,以便采精员能躲藏到栏后,集精瓶等可临时放在栏后。
? 当接近公猪时,随身保留一块赶猪板。
? 采精区域的地面不能打滑(可垫一层不打滑的漏缝橡胶垫,有齿木板或木屑)。
? 假母猪要稳定,最好固定在采精室的中间,这样有助于保证采精时的安全。
每次采精后,都要清洗采精室,否则干燥后的精液胶体就难以去除,如果房间清洁,公猪的烦躁就会减少。
(二)公猪的保定设施
用金属建造一个保定栏,在采血、公猪剪牙及常规检查中套猪器是很有用的。
(三)假母猪
假母猪有多种设计(图3),多数用钢和木材建造,上面用粗帆布覆盖,专业生产人工授精设备的公司可提供假母猪,也可自己建造。当公猪爬跨时,假母猪上应有木制或用橡胶覆盖的扶手。
图3 假母猪
有些公猪不需任何刺激就会爬跨假母猪,而有些公猪则需要一些鼓励,可以收集一些发情母猪的尿液来渗在覆盖的帆布上。
五 怎样调教公猪
调教一头新公猪需要大量的耐心,让公猪同后备母猪交配1~2次有助于调教。
? 当另一头公猪完成采精后,将新公猪赶到假母猪前,多数年青公猪会对假母猪表现出浓厚的兴趣,并会仔细地观察假母猪,几分钟后就会爬跨假母猪。在第一次采精时要确保公猪不受任何形式的伤害。
? 如果15~20分钟后,年青公猪仍不能爬跨假母猪,就将其赶回圈内,等待明天再试。将公猪饲喂在采精室(圈)附近,能使公猪有额外的刺激感觉。
六 哪里处理精液
人工授精实验室
要建立一个叫做“人工授精实验室”的房间或区域,利用人工授精实验室是为了:
? 准备采精设备。
? 检测精液。
? 准备稀释液、稀释精液。
? 保存精液。
? 清洗人工授精设备。
实验室的位置很重要,可能的话,应直接同采精室相连以便最快地处理精液。用一窗口来连接人工授精实验室和采精室有助于增强防疫措施,因为在采精员将精液递到实验室时,能避免将其鞋子和衣服上的病原带入。
在人工授精实验室的所有操作都应建立卫生制度。房间的地面要易于清洗、墙面可擦洗,墙上应有小储柜、可清洗的工作台、污水池和晾干架等,至少要有4个插孔的电源和冷热水源。实验室的布置要视其操作规模而定,小房间易于保持清洁,同时要准备足够的消耗性用品,如(输精导管、手套、化学制品)。
不论是大型的商业化或小型的家庭式的人工授精实验室,都要按最高的卫生标准来使用和维护人工授精实验室及其设备(图4)。
图4 人工授精实验室
对多数商业化人工授精站来说,最好采用一次性的输精瓶,以避免因设备清洗不干净时所带来的潜在问题。对输精导管来说也是同样的道理,如果可能的话,使用一次性输精导管。
如想尽可能多次地重复使用的话,就必须建立有效的设备清洗和消毒程序。如果将脏的设备带回人工授精实验室来清洗,应小心避免对已消毒的设备的交叉感染。清洗后再煮沸所有设备。在清洗设备时,不要使用洗涤剂或消毒剂,最后还要用蒸馏水或反渗透水来清洗。再次使用之前,要将所有设备干燥,因为水份可能杀死精子。一旦消毒后,就要将玻璃瓶口封住,密封量具,并将所有玻璃器皿放在清洁、无尘的存储柜中。