人工授精技术介绍及操作规程

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一次采精时公猪射出精液的数量为150-400ml。公猪射精过多或过少，应分析原因。过少可能采精次数过多；或公猪生殖机能衰退，或日常管理不当，或采精技术不熟练造成；过多则可能有水分混入，或是由于副性腺分泌过多，或混入尿液等。此外，精液中不应有毛发、尘土或其它污染物，含有凝固和成块物质（不同于胶状物质）的精液，表明生殖系统有炎症，这种精液不能使用。（2）色泽 正常精液为淡白色或淡灰白色。如精液呈现淡绿色是混有脓液，呈淡红色是混有血液，呈黄色是混有尿液，均不能使用。（3）气味 一般正常精液无味或微带有腥味，带臭味或尿味的精液不正常，不能作输精用。（4）PH值 猪液为弱碱性，PH值为7.5左右。可以用比色纸测定。 2、精子活率（活力）检查活率是指在公猪精液中具有直线前进运动的精子在总数中所占的百分率。它与精子受精能力密切相关，是评定精液品质的重要指标。一般要求在每次采精后，精液稀释后，输精前均应进行活率检查。（1）平板压片法（2）悬滴检查法 在盖玻片上滴一滴精液，然后将盖玻片翻转覆盖在凹玻片的中间，制成悬滴标本。使用带有加热板的显微镜（或将显微镜置于37-38度的保温箱中）检查，放大200-400倍观察精子呈直线运动的状况，按十级评分法评定。如视野中有10%的精子呈南线前进运动，评定为0.1级，有20%的精子呈直线前进运动，评定为0.2级，依此类推。活率不低于0.7级才可进行稀释配制，若为冷冻精液，解冻后不应低于0.3级，才可用作精液。 3、精子密度检查精了密度是指1ml精液中精子的数量，这也是评定精液品质的一个重要指标，同时也是确定输精的依据。估测是检查精子密度常用的一种方法，要与精子活力检查同时进行。用玻棒取原精液一滴于载玻片上，加盖坡片做成压片，在显微镜下放大400-600倍检查，根据视野中精子分布情况和稠密分为密、中稀三个等级。密：整个视野中布满精子，精子之间的空隙小于一个精子长度，看不清各个精子的活动，每客升"密"级精液含有精子约10亿个以上。中：视野中精子较多，要见各个精子活动，精子之间的间隙在1-2个精子长度间，每毫升"中"级精液含有精子约2-8亿个。 "稀"：视野中精子很稀少，精子之间的间隙在2个精子长度以上，每毫升"稀"级精液含有精子约2亿个以下。在生产实践中，活力与密度结合评定。要求公猪精液达到"中"级密度，"稀"级密度活力在80%以上，才可用于输精。还可用类似血细胞计数法测定精子密度，较费工时，可用于全面检查公猪精液品质时采用。此外，还可用光学仪器，如分光光度计，光电比色计等测定，测定准确迅速。 4、精子形态学检查主要检查精子畸形率，即畸形精子占精子总数的百分率，要求畸形率不超过18%-20%为宜，否则不能作输精用。畸形精子种类很多，如头部畸形包括头部巨大、瘦小、细长、圆形、双头等，颈部畸形如颈部膨大、纤细、屈折、不全、带有原生质滴、不鲜明、双颈等；中段畸形包括弯曲、屈折、双体等；主段畸形包括弯曲、螺旋形、回旋、短小、长大、双尾等。畸形精子产生的原因有：公猪利用过度或饲养管理不良，或长期未配种，采精操作不当，睾丸和附睾疾病等。检查方法：（1）抹片：取原精液一滴作抹片，自然干燥。（2）用96%的酒精或5%福尔马林固定2-3分钟，用水冲洗。（3）再用美蓝或龙胆紫等染色液染色23-5分钟，用水冲洗。（4）待干后，在显微镜下放大400-600倍检查。也可将（2）、（3）步骤合二为一，即染色固定；用龙胆紫酒精液或红、蓝墨水染色3-5分钟，用水冲洗，干后检查。要求镜检计数200-500个精子，记录观察到的畸形精子数和精子总数，即可得出畸形精子百分率。（四）精液稀释和分装 1、稀释液的标准：专用稀释剂有KIEV、BTS、20rPVa等。所有的商品稀释剂均标明了使用方法及用途（包括配制方法及保存天数）。 2、稀释份数的确定：确定稀释份数的依据是精子密度，如果现场没有条件用显微镜检查精子密度，通常可进行6-8倍稀释。 3、精液的稀释：应小心地将精液倒入稀释液，稀释液与精液温度应一致，起码不能相有差1度。 4、稀释后的精液分装：稀释后的精液即可有于母猪的输精，为方便使用，运输和保存，通常分装在特制的一次性塑料瓶或塑料袋中等用，塑料瓶或塑料袋的容量通常是100毫升，可装60-80毫升精液。可用不同颜色的塑料瓶装不同品种猪的精液，以未区分，并粘贴标签，注明日期，公猪品种，耳号及精液编号等，瓶装精液便于输精操作。 5、新鲜精液在现场如即采即用，可用等渗的葡萄粮液（5%）或等渗的葡萄粮生理盐水（37度）做6-8倍的稀释，这种方法省事又有效。 6、抗生素等添加剂必须在稀释消毒冷却至室温后再加入，否则影响其效价。（五）注意事项 1、分装后的精液如果要保存备用，则不可立即放入17度左右的恒温冰箱内，应先留在冰箱外1小时左右，让其温度下降，以免因温度下降过快刺激精子，造成死精子等增多。 2、从放入冰箱开始，每隔12小时，要摇匀一次精液，因精子放置时间一长，会大部分沉淀。每次摇动时，动作要轻缓均匀，同时观察精液的色泽状况，并做好记录，发现异常及时处理。 3、保存过程中，要切实注意冰箱内温度的变化（通过温度计的显示），以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。 4、远距离购买精液时，运输是关键的环节。高温的夏天，一定要在双层泡沫保温箱中放入冰块（17度恒温），再放精液进行运输，以防止天气过热，死精太多，严寒的季度，要采取保温措施防止精液因寒冷使精子死亡。六、发情鉴定输精呀者交配时间对于妊娠结果和母猪的窝产数相当关键。因此必须要知道正确的输精时间，要做到这一点，只能进行日常发情检查。 1、初产母猪：6-7月龄的小母猪开始表现发情行为。为了达到良好的妊娠和窝数，建议跳过第一次发情，在3个星期后，即第二次发情时再输精或者配种。大多数情况下，母猪在断奶后10天才开始第三次发情。 2、经产母猪：成年健康的经产母猪通常在仔猪断奶后4-7天开始发情。发情母猪的外阴部开始轻度充血红肿，逐渐变得明显，阴户内粘膜的粉红颜色由浅到深，许多发情的母猪都有爬跨其它母猪的表现，也任其它母猪爬跨，这是母猪发情的最基本表现，当饲养员用力压母猪背部，若母猪呆立不动（又称呆立反应），则表明母猪具有强烈的交配欲，说明母猪已进入发情旺期，最适合输精。 在集约化大型养猪场，可让试情公猪在母猪舍走廊上走动，与受检母猪接触、沟通，发现有发情表现时，饲养员再进入母猪栏内，逐头进行压背检查，以判定发情程度，决定是否输精。 3、在猪场管理良好的条件下，断奶后8天内90%的母猪会同时发情，但有时，虽然猪场的环境和发情控制都比较好，但是母猪仍然不能合适的时间内发情，这时可以使用PG600来尽量减少空怀期的天数。发情检查最好是在饲喂后半小时左右进行，这时所有的母猪都比较安静，容易检查出发情的母猪。当使用试公猪时，观察母猪的反映比监控公猪的行为更加重要。 使用人工授精技术要提前预定精液，然后再决定发情检查的时间。 4、控制发情的两种途径为：（1）最好的方法在晚上用试情公猪进行发情检查，早上不用试情公猪。使用这种方法，可以检查出发情母猪或者在10小时内将发情的母猪。在下午检查出的发情母猪应该在第二天授精。在试情公猪前没能明显的发情表现，便即将发情的母猪应该在第二天早上再次进行发情检查。在检查时，如果在人工刺激下，明显地表现发情，这些母猪也可以进行授精。初产母猪也应该在早上用试情公猪进行再次授精，在次日早上应该在没有公猪的条件下再次进行发情检查。如果它们仍然处于发情状态，而且没有明显的发情退化，应该给它们再次授精。为了取得最佳的繁殖成果，要求应该有10-30%的再次配种率。如果在早上用试情公猪检查较老的母猪发情情况，那再次授精的可能性较大。尽管母猪在次日才能有良好的发情表现，但是在头一天就可以授精，这就意味着母猪还要接受第二次授精。（2）较好的方法只在早上检查发情。如果不用试情公猪检查发情，而且检查出所有的母猪都已发情，这种方法是相当好的，所有发情的母猪应该在同一天授精。常用发情公猪来检查发情，所有处于第一和第二公猪期的母猪可以检查出来。正常的发情行为可以分为3个时期： A第一公猪期母猪在公猪前表现出发情行为，但在饲养员前没有明显征兆。 B、授精期母猪在公猪和饲养员面前全部表现出明显的发情行为。授精期又分为1-1至1-4四个时期； C、第二公猪期母猪在公猪面前表现出发情行为，但是在饲养员面前没能发情行为。要想取得最好的繁殖性能和最大的窝重，授精时间应该在授精期的前3/4时期内。对于每一个时期，妊娠母猪的比例都与窝产数相乘，用以表现每个发情期内每头母猪的平均产仔数。如果母猪授精太迟，授精卵老化而且已经死亡。 如果发生了以上两种情况，母猪的返情率增加，而且窝重降低。母猪的排卵的时间在1-3期，而且在以后的6小时之内都可以授精。从授精后5小时到24-30小时之内精子细胞都有受精的活性。上面提到的时间都是平均值。对于母猪的每个个体而言，这些时间要能会由于以下因素的作用而有所不同；年龄、管理和遗传。七、输精输精是人工授精技术的最后一关，输精效果的好坏，关系到母猪发情的受胎率和产仔数的高低，而且输精管插入母猪生殖道部位正确与否，则是输粗技术成败的关键。 1、适时输精在进行人工授精时，由于新鲜精液的精子活力强，死精率低，所以母猪的受胎率高；保存的精液随着保存时间的影响，精子活力逐渐变弱，死精子数增多，母猪受胎率偏低。适时输精的时间可以这样掌握，上午发现有呆立反应的母猪，下午输精一次，第二天下午再时行第二次输精；下午发现有呆立反应的母猪，第二天上午输精一次，第三天上午现进行第二次输精。最成功的输精应在呆立反应开始后18-30小时进行。 2、输精的准备输精前，精液要进行显微镜检查，检查精子密度、活力有死精率等。死精率超过20%的精液不能使用。输精使用的输精管，要严格清洗、消毒并使之干燥，用前最好用精液冲一下。要清洗待输母猪的外阴部，并用一次性消毒纸巾擦士，预防将病原微生物等带入母猪阴道。 3、输精管的选择输精管有一次性和多次性两种。一次性输精管多具有海绵头结构，其后连一直径约5毫米的塑料细管，长度约50厘米。根据海绵头的大小分成两种，一种海绵头较小，适用于后备母猪输精；另一种海绵头较大的适用于经产母猪输精。海绵头一般用质地柔软的海绵制成，通过特制胶与塑料细管粘在一起，很适合生产中使用。选择海绵头输精管时，一应注意海绵头粘得牢不牢，不牢固的则容易脱落到母猪子宫内；二应注意海绵头内塑料细管的长度，一般以0.5厘米为好，若塑料细管在海绵头内偏长，则海绵头在硬，容易抽伤母猪阴道和子宫颈口粘膜，若偏短则海绵头太软而不易插入或难于输精。一次性的输精管使用方便，不用清洗，但成本较高，大型集约化养猪场一般使用一次性输粗管。多次性输粗管是用特制无毒橡校制成的类似公猪阴茎的胶管，因其具有一定的弹性和韧度，适用母猪的人工授精，又因其成本较低和可重复使用较受欢迎，但因头部无膨大部，输精时可出现倒流，并用每次使用后均应清洗、消毒，干燥等，如若保管不好还会变形，因此使用受到一定的限制。 4、输精方法及步骤输精时，先在输精管海绵头上涂些精液或消毒的液体石蜡，以利于输精管插入时的润滑，并赶一头试情公猪在母猪栏外，刺激母猪性欲的提高，可促使精液吸入到母猪的子宫内。 清洗并擦干母猪的外阴部后，将输精管沿着稍斜上方的角度慢慢插入阴道内，当插和25-30厘米左右时，会感到有些阻力，此时，输精管基本顶到了子宫颈口皱壁处，用于再将输精管左右旋转，稍一用力，输精管的海绵关就可进入子宫颈第2-3皱折处，发情母猪受到此刺激，子宫颈口括约肌收缩，将输精管锁定，再回拉理则感到有一定的阻力，此时便可进行输精。用瓶装输液输精时，当插入输精管后，用剪刀半精液瓶盖的顶端剪去，插到输精管尾部就可输精；用袋装精液输精时，只要将输精管尾部插入精液袋入口即可。为了便于精液吸入到母猪的子宫内，可在输精瓶底部开一个口，利用空气压力促使精液吸入。 输精时输精人员同进要对母猪腹肋部进行按摩，实践证明，这种按摩更能增加母猪的性欲。输精人员倒骑在母猪背上，并进行按摩，操作方便，输精效果也很好。正常的输精时间应和自然交配一样，一般为3-10分钟，时间太短，不利于精液的吸入，太长则不利于工作的进行。为了防止精液倒流，输完精的不要急于拔出输精管，将精液瓶或袋取下，将输精管尾部失个扣，这样既可防止空气的进入，又能防止精液倒流。 八、效益对比在自然交配的情况下，1头公猪每年可承担25头母猪的配种任务，而采用人工授精技术，每年最大可担负250头母猪的配种任务。假如年度内有1000头母猪需要配种，若采用自然交配，需40头种公猪，而人工授精仅需4头种公猪，以每头种公猪年耗料750千克，饲料成本大约1125元，人工授精共节约饲料费用4.05万元。以每年淘汰1/3公猪计算，自然酱淘汰13头，人工授精淘汰2头，以每头种公猪3000元计算，人工授精省去购买公猪费用3.3万元，综合计算使用人工授精配种1000头母猪可节约费用4.05万元，再加上节省建造公猪栏舍的费用、饲养公猪的人工费用等，使用人工授精经济效益是显而易见的。
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