非洲猪瘟十一种在研的疫苗比较

　　非洲猪瘟在世界范围广泛流行，发病率及死亡率高，一年四季均可发生。2018年8月1日，国家外来动物疫病研究中心接到辽宁省沈阳市沈北区发现 ASF临床可疑病例的报告。随后确诊。目前在世界范围内没有研发出可以有效预防非洲猪瘟的疫苗，但是世界上对非洲猪瘟疫苗的研发并未停止。下面我们就来看一下非洲猪瘟疫苗开发的相关内容吧。

　　一、非洲猪瘟疫苗开发的一般流程和主要困难

　　1 、遗传多样性

　　目前，依据 p72 基因 （B646L） 末端核苷酸的差异， 可将 ASFV 分为24 个基因型，基于病毒是否会引起红细胞吸附的特性，已鉴定出至少有 8 个血清群。

　　2、 免疫保护机制不清楚

　　3、 结构复杂

　　基因组巨大为170-190kb，功能性蛋白超过两百个

　　4、 可选择的入侵方式

　　ASFV 可通过受体介导的内吞作用或非特异性的巨胞饮作用入侵靶细胞。

　　5、免疫逃避

　　ASFV 主要靶向单核-巨噬细胞系统，通过抑制细胞凋亡、宿主免疫应答等策略逃逸宿主免疫防御系统。

　　6、 疫苗开发面临的其它难题

　　基因缺失疫苗被认为是短期内最有希望开发成功的疫苗，具有同源保护作用，也能抵抗异源毒株的攻击，但存在安全隐患，进一步鉴定及敲除毒力基因后具有很大应用前景然而，该类疫苗在商业化的进程也面临诸多挑战：1） 需建立区别疫苗免疫与野毒感染的 （Differentiating infected from vaccinated animals， DIVA） 诊断方法；2） 需构建病毒稳定表达的细胞系，原代单核-巨噬细胞仅限于实验室对 ASFV 生物特性与免疫原性的研究，不适合用于疫苗批量生产，其它易感细胞传代后病毒容易变异；3） 需建设安全的病毒操作平台， ASFV 致病性、攻毒模型、免疫效力评价需在动物生物安全三级 （ABSL3） 以上实验室进行；4） 安全性及免疫原性评价周期较长，基因缺失疫苗专利申请及兽药证书的审批需要严格评估程序，确保毒株在宿主及环境中安全、遗传稳定，且免疫效力不受影响。

　　二、十一种在研非洲猪瘟疫苗的比较

　　1

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：MGF360-505R缺失和CD2v与MGF360-505R联合缺失基因型：Ⅱ，我国

　　毒株：Pig/CN/HLJ/2018

　　构建单位：农业科学院哈尔滨兽医研究所

　　效果：能提供对非洲猪瘟流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。

　　研究阶段：截至8月，临床中试

　　2

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：CD2v和 MGF 基因

　　基因型：Ⅱ，我国

　　毒株：SY18

　　构建单位：军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

　　效果：接种猪能够抵抗亲本毒株SY18株的攻击

　　研究阶段：安全有效评价

　　3

　　类型：亚单位疫苗

　　构建策略：2018年分离的沈阳毒株CD2v蛋白出发，经剪切优化后，用CHO细胞表达系统表达了重组CD2v蛋白。

　　基因型：Ⅱ，我国

　　毒株：SY18

　　构建单位：青岛易邦生物工程有限公司

　　效果：本发明的表达非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表达量高易于纯化，可用于鉴别诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。

　　研究阶段：构建完成，具体不详

　　4

　　类型：亚单位疫苗

　　构建策略：在SF9细胞中表达非洲猪瘟CD2v蛋白的重组杆状病毒基因型：Ⅱ，我国

　　毒株：SY18

　　构建单位：青岛易邦生物工程有限公司

　　效果：本发明的表达非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表达量高易于纯化，可用于鉴别诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。

　　研究阶段：构建完成，具体不详

　　5

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：通过不同的转染质粒构建不同的缺失突变体p72DA224LGUS10T,p72DA238LGUS10T和 p72DEP153RGAL10T 在COS7细胞系，以及p72D276RRGAL10T 在PAM细胞系

　　基因型：I，西班牙

　　毒株：NH/P68

　　构建单位：CSIC-UAM

　　效果：不同的缺失突变体对Arm07毒株有一定程度的保护作用，能够减少临床症状的程度

　　研究阶段：安全有效评价

　　6

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：EP402R基因的单核苷酸缺失造成ORF移吗，提前产生终止密码子基因型

　　毒株：Lv17/WB/Rie1

　　构建单位：马德里动物健康研究中心；马德里康普顿斯大学

　　效果：口服使用，对野猪Arm07毒株的感染的预防保护力为92%

　　研究阶段：安全有效评价

　　7

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：缺失特异性毒性相关的9GL（B119L）和UK（DP96R）基因基因型：Ⅱ，美国

　　毒株：Georgia 2007

　　构建单位：美国农业部

　　效果：在体内，甚至在相当高的剂量下（ 106HAD50 ）对猪肌内施用ASFV-GΔ9GL/ΔUK也不会诱导疾病。重要的是，在感染28天后使用毒性的亲本毒株Georgia 2007攻击时，使用104或106HAD500感染的动物稳定地受到保护而免于临床疾病的表现。

　　研究阶段：安全有效评价

　　8

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：缺失：多基因家族360基因9L，10L，11L，12L，13L和14L；和多基因家族505基因1R ，2R ，3R和4R。缺失DP148R基因基因型：Ⅱ，英国

　　毒株：OURT88/3是来自葡萄牙的ASFV的非致病性分离株

　　构建单位：皮尔布莱特研究所

　　效果：本发明人已经发现，与肌内给药相比，鼻内施用减毒的ASF病毒在较低的剂量下是有效的。疫苗可以在初免-加强方案后施用。例如，在第一次接种后，受试者可以在一段时间（例如约7，14，21或28天）之后接受第二次加强施用。通常，加强施用的剂量高于初免施用的剂量。

　　研究阶段：安全有效评价

　　9

　　类型：减毒活疫苗

　　构建策略：不详

　　基因型：Ⅱ，越南

　　毒株：不详

　　构建单位：越南国立农业大学

　　效果：在实验室和越南北部的三个农场使用效果良好研究阶段：安全有效评价

　　10

　　类型：核酸疫苗

　　构建策略：将重组K205R-IRES-A104R-IRES-E183L基因连接至pMD19-T载体，将亲本质粒转化感受态细胞，扩增后提取质粒即克隆质粒，在克隆质粒中提取目的片段；将目的片段进行体外转录即得mRNA。

　　基因型：不详，我国

　　毒株：不详

　　构建单位：四川农业大学

　　效果：不详

　　研究阶段：完成了构建，后续工作不详

　　11

　　类型：重组腺病毒

　　构建策略：非洲猪瘟EP153R与P54基因共表达的重组腺病毒载体构建及腺病毒包装基因型：不详，我国

　　毒株：不详

　　构建单位：扬州大学

　　效果：不详

　　研究阶段：完成了构建，后续工作不详

　　对于是否使用商业化的疫苗目前在我国业界依然存在一定的争议，同时对于临床上流行的各种所谓的“疫苗”大家需要擦亮双眼，避免上当受骗遭受双重损失，目前尚无任何一种非洲猪瘟疫苗商业化，即使到时有商业化的疫苗，对于不同的所谓的“疫苗”毒株，以及不同类型的野毒株之间都需要进行鉴别诊断，选择针对性的方法，避免不必要的损失。