搜牧·中国禽病网讯,鸡新城疫病是危害
养鸡的一种严重传染病,对新城疫的防治要按免疫程序进行免疫。在免疫监测的实际操作中,监测结果受到诸多因素的影响。在检测鸡ND抗体效价时应该注意的方面有: 1、抗原方面 免疫监测实质上是一个抗原抗体反应的过程。在此,抗原的效价一定得标定正确,每次监测之前一定先准确测定抗原的效价,应该是同时测2-3遍取其平均值,然后根据其准确效价配制所需病毒液(如4单位病毒)。 2、抗体方面 检测抗体水平,需取血清为检测样本。要采样的过程中及盛放样本的试管不能污染,不能含有杂质,不能含有与抗体无关的蛋白质。也不能加有抗凝剂,不能有溶血物,否则血清就不易分离或影响其抗体的效价。分离好的血清应该是淡黄色透明液体。 3、红细胞方面 红细胞的制备非常重要。红细胞应采自没有免疫过的成公鸡,未成熟的公鸡红细胞较脆弱,易溶血,不能用。红细胞经过反复离心洗涤后配成0.75%为最好。 实践证明,0.5%和1%的红细胞都不如0.75%的好,这是由于现在普遍使用的微量法测定,在96孔反应板上进行,红细胞量的多少也会影响结果,过多过少时都会影响结果的准确性。 4、操作过程应注意的方面 (1)加样时,各种成分一定要掌握准确的剂量。移液器是定量的,但受操作者手用力的影响,用力大小不匀时,吸取的量就不均匀,用力正好在标定的刻度上,能吸取均匀等量的样液,这是一个要求技术人员反复操作熟练的过程。注意在取样时每次取样吸头中不得含有气泡,如果有气泡存在会占有体积,取样量又会因此而不准确,而造成检测结果的误差。 (2)在每一次做抗体监测时都应该做回归试验,并且每个反应板都要做一个回归。还必须设有标准阳性对照和标准阴性对照,这样才能反映出每一个反应板中各个待测样品的真实情况。由于配备好的4单位病毒受外界因素影响,时常发生变化,可以根据回归试验的结果来判断样品检测结果的准确性。 (3)抗体免疫监测试验在室内温度下均可以进行,但是温度不同结果出现的时间是不同的,22-28℃条件下最适宜,有条件的可在恒温箱内进行反应。没有恒温箱的在自然条件下反应也可以,但是要掌握好观察结果的时间。 (4)操作时加入抗原和抗体后要在微量振荡器上进行一次振荡1min,让其作用后再加入红细胞,再进行第二次振荡1min,两次振荡的目的是使各样品充分混匀,达到充分作用的效果。然后放在22-28℃的温箱或室内。
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