猪旋毛虫病酶联免疫吸附试验试验盒的使用方法

     本品系用旋毛虫标准虫株，通过人工感染猪体的肌幼虫制成排泄-分泌抗原，再用旋毛虫单克隆抗体通过亲和层析法制成纯化抗原，包被于聚苯乙烯微量反应板，并配以1、2、3、4号试液和阴、阳性血清组装而成。用于诊断猪旋毛虫病。     【性状】抗原包被板无色，透明，干燥，无杂质吸附。         1号试液为淡黄色澄明液体。2号试液为淡乳白色液体。3号、4号试液为无色透明液体。     阴、阳性血清为淡黄色透明液体。     【作用与用途】用于诊断猪旋毛虫病的酶联免疫吸附试验。     【用法与判定】     (1)样品准备  被检血清作l：100稀释，血片作1 ：lO稀释，阴、阳性血清作1：200稀释。     (2)加样  反应板的每孔加检样2滴(约100μL)，并设阴、阳性血清对照，室温静置2～3min。     (3)反应  甩掉被检液，每孔加1号试液1滴(约40μL)，室温静置2～3min。     (4)洗涤  甩掉1号试液，每孔加2号试液1滴，立即用自来水或蒸馏水反复冲洗5次。     (5)显色  拍干残液，每孔先加3号试液1滴，再加4号试液1滴，轻轻混匀，静止2～5min。     (6)判定  在白色背景下，按下列标准判定：吸收度≤0．3、蓝色为阳性；吸收度≤O．08、无色为阴性。                        肉眼观察                       吸收度(450nm) 
＋＋＋＋   蓝色，明显深于阳性参照血清         <0．8 
＋＋＋     蓝色，深于阳性参考血清             ≤0．8 
＋＋       蓝色，近于阳性参考血清             ≤0．5 
            ＋         蓝色，淡于阳性参考血清             ≤0．3 
            －  无色或颜色浅于或接近阴性参考血清          ≤O．08 
    【注意事项】     (1)每孔加入的1、2、3、4号试液的量要均等，最好加到孔中央，并严禁冻存。     (2)每孔加入2号试液后，必须用水充分冲洗，洗涤不彻底会影响结果。     (3)第1号试液要密封保存，污染后不宜使用。第2、4号试液比较黏稠,要注意加足量。     (4)室温低于25℃时，可适当延长每次反应时间，但最终判定结果,应在5min内完成。     (5)运输途中应避光、避高温和避碰撞。     【贮藏】在2～8℃，有效期为10个月。     【规格】     (1)200头份／盘(含40孔包被板5块、l号试液8mL／瓶，2号试液8mL／瓶、3号试液8mL／瓶、4号试液8mL／瓶、阴、阳性血清各2mL)     (2)400头份／盒(以上各种试剂加倍量) 饲料与营养

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