猪圆环病毒的综述分析

 　一、由来与相关猪病

　　猪断奶后衰竭综合征(PMWS)的主要病原体,己被世界各国学者确认为圆环病毒(PCV-2) 本病最早发现于加拿大(1991),1996年暴发该病,同时此病很快在美国、西班牙、英国、丹麦、德国、荷兰、比利时、立陶宛、奥地利和意大利发生。除上述国家外,近年来,日本、韩国、泰国、捷克、墨西哥、匈牙利、中国以及台湾地区均有此病发生和流行,另外PCV-2与许多猪相关疾病的发生有关。除PMWS之外,PDNS(猪皮炎与肾炎综合征)、PNP(增生性坏死性肺炎)、PRDC(猪呼吸道综合征)、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV-2感染有重要关联。

　　PCV-2及其相关联的猪的疾病已在全世界范围内发生和流行,死亡率10-30%不等。较严重的地区,猪场在暴发本病时死淘率高达40%左右,其危害和造成的重大经济损失显而易见,现已被世界各国的兽医与养猪业者公认为本病是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的重要的猪传染病。

　　为了便于国内同仁了解PCV-2与相关猪病的发生、流行以及防制此病作参考,笔者现将参加第十六届世界猪病大会(墨尔本2000.9)和第十七届世界猪病大会(依阿华2002.6)所获得的有关资料和信息以及笔者的点滴积累，择要陈述如下：

　　(一)、圆环病毒PCV-2的由来

　　根据Steve R Bolin和Gordon M Allan所著'老病毒还是新病毒一在不断演变的世界中'一文中,作了较充分的阐述,其要点为：

　　1.当代与回顾性抗体调查证明,PCV-2感染猪的历史至少已经历了三十多年。近年来的研究表明,采用间接免疫过氧化物酶测定(IPMA)和单克隆抗体竞争性ELISA,从1969年以后存档的血清中检测出PCV-2抗体。

　　2.当代和回顾性研究表明：PMWS在猪群中至少已有十五年。

　　与PCV-2相关的PMWS,1991年在加拿大西部发现,1997年作了最初报道。在此之后法国(北部)、西班牙和意大利均有暴发PMWS的报道。西班牙和英国对1986年以前存档的猪组织样品分析表明,已有经典性的PCV-2相关的PMWS病例和病理损害。

　　3.当代和回顾性研究表明： PCV2的基因组十年来未发现有较大的改变。

　　25年前,美国ATCC发现某些PK15细胞系中被污染了一种现称之为PCV1的病毒,将其实验感染出生后不同时期的猪,证实没有致病性。而后来又发现PCV1,可经垂直传递使胎猪感染,致使初生仔猪发生'先天性颤抖病'。

　　现有的研究结果表明,PCV2与PCV1在抗原性和遗传性上都不同。但到目前为止,而世界上许多国家,从发病和不发病的猪中分离到的PCV2,用单克隆抗体或多克隆抗体检查,所有鉴定的PCV2各毒株,在抗原性上都'相似',而且这些毒株的基因组具有>90%的相似性。

　　据J Choi等报告,他们对来自英国、加拿大、法国和美国的两株PCV2作核昔酸序列测定,其毒株来源不论是PMWS或者CT(先天性颤抖病),其同源性>96%,而与另外4株PCV1株比较同源性仅为72%。该报告还认为:①所有PCV2分离株形成一个单一的主要基因型。②PCV2基因组的次要遗传性差别比较稳定,并代表了不同地区来源。③PCV2基因组内≥96%核昔酸相同。

　　另据报道,用1993年一头无病猪组织分离到的PCV2作实验感染,复制出了PMWS 临床病症。对该毒株作基因组和抗原性鉴定与近期分离到的PCV2,没有发现大的差别。

　　4.PCV2相关疾病的暴发与流行的原因

　　(1)集约化养猪的出现,导致管理操作的改变。

　　(2)宿主遗传性状的改变,与世界范围内的流动。

　　(3)早先出现的PPV和PRRS等病原体的混合感染。

(二)、PCV2与相关猪病

　　自1996年以后,PMWS和其他PCV2相关的猪病在全球都被确认,诚然PCV2与PMWS的联系是结论性的,而PCV2在其他综合征中的作用需要进一步澄清。

　　1.仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)

　　PMWS的确诊需要一头猪或一群猪有一组特征性的临床症状和显微病理损害,其临床表现有：生长不良或停滞、呼吸困难、淋巴结肿大、腹泻、苍白和黄疸。但在一头猪中,常不全部表现出这些基本症状。在病猪群中有时亦见有包括咳嗽、发热、胃溃疡、中枢神经障碍和突然死亡,其中有些症状可能与继发感染有关。特征性显微病理损害表现为淋巴器官的肉芽肿炎症和不同程度的淋巴细胞缺失,大体解剖还可见肺斑点状出血。

　　PMWS的临床症状最原始的报道,主要局限于吮乳期和断奶后3-6周的仔猪,在美国主要发生10-20周龄的猪。本病在北美常常导致低度的但持续的病死损失,但亦偶尔发生导致断乳仔死亡率增高3-4倍(死亡率5-20%)。在英国、法国、西班牙等几个欧洲国家,似乎更常见到PMWS引发持续性病损,断奶后死亡率超过25%的现象并不少见。笔者在海南和河南等省发现个别猪场高达40%的死亡率。

　　现有各国的研究成果和实地流行病学调查结果足以表明, PCV2是PMWS发生的主要角色,但触发PCV2感染,并使其发展为PMWS尚需诸多因素,如病原体的共同感染(PRRS、PPV、其他病毒或细菌);免疫剌激(佐剂和疫苗);环境因素(氨、内毒素);因激因素(运输、猪群合并);宿主遗传易感性存在差别。

　　2.猪皮炎和肾病综合征(PDNS)

　　PDNS最早在英国记述,被认为是一种免疫介导的水疱性病,影响皮肤和肾。最常见的临床症状为,皮肤发生圆形或不规则形的隆起,呈现红色或紫色中央为黑色的病灶。病灶常融合成条带和斑块。病灶通常在后躯、后肢和腹部最早发现,有时亦可扩展到胸肋或耳。发病温和的猪体温正常,行为无异,常自动康复。发病严重者可能显示跛行、发热、厌食或体重减轻。剖检所见：肾肿大、苍白,常被出血小点覆盖。特征性的显微损害为全身性坏死性脉管炎和纤维蛋白坏死性肾小球性肾炎。这种病损是Ⅲ型过敏反应的特征,属免疫介导性障碍,由免疫复合物在脉管和肾小球微血管的管壁上沉淀引起。

　　PDNS在吮乳期至生长发育期的猪通常散发。但在欧洲引起10-20%的死亡率并不少见,而在北美仍较少发现,即使发生猪群亦只有0.5%被感染。PDNS与PCV2之间存在着牢固的和不断增强的联系,因为PCV2抗原和(或)核酸或病毒本身,在多数PDNS病猪组织内发现,许多病猪伴有淋巴细胞缺失,与PMWS的特征一样。据报道欧洲许多猪群PMWS和PDNS几乎同时暴发。另外其他病原体如多杀性巴氏杆菌,或者PRRS和PCV2联合可诱发PDNS。但至今尚未见到一种能复制与　　　　PDNS完全一致的病理损害的实验报告。PDNS日渐发展成为皮肤病损的常见疾病,因此必须注意与其他疾病相区别,如猪丹毒、猪瘟、多灶性渗出性皮炎、猪痘等。

　　3.PCV2相关性繁殖障碍

　　1999年加拿大West首次报告以后,有关PCV2相关的繁殖障碍己有多次报道。感染猪场显示的临床症状都是一致的,包括流产、死产、木乃伊胎增多、断奶前死亡率上升。在死产和新生仔猪中最常见的病理损害为非化脓性到坏死性或纤维性心肌炎,并含有PCV2抗原。实验接种证实,心是猪胚中PCV2增殖的主要场所。

　　PCV2相关的繁殖障碍主要发生在初产母猪或导入的新猪群中,但值得关注的是尚未发现发病猪群中与PMWS或PDNS同时暴发。然而,在不吮初乳猪暴发PMWS中PCV2感染是肯定的,由此推断垂直传染是可能的。PCV2经公猪精液排出已经证实。了解PCV2在繁殖障碍中的流行病学和性传递,保持良好的繁殖健康和性能将具有深远的意义。

　　4.PCV2相关性肺炎

　　在PMWS和PCV2相关性肺炎的诊断中有许多是交叉的,要区分两种疾病是困难的,取决于递交给诊断实验室的样品。例如在衣阿华州立大学兽医诊断实验室(ISU-VDL)诊断的大多数PMWS病列都具有肺炎,在非呼吸道组织中没有特征性病损的迹象,可被认为是PRDC(猪呼吸道病复合症)病例。PRDC通常指生长一育肥猪的肺炎,典型的是呼吸道病原微生物的混合感染,包括猪肺炎霉形体(M.hyo)、猪流感病毒(SIV)、PRRSV、多杀性巴氏杆菌和其他。PCV2日益与呼吸道病相关联,如美国的PRDC。例如在2000年送交ISU-VDL的PRDC病例中。PRRSV、PCV2、 M.hyo和SIV分别占42%、22%、22%和19%。这些病例存在延长的临床情况特别严重的细支气管炎和细支气管纤维变性,在病损中存在大量PCV2抗原,由此推断为PCV-2相关的PRDC。

　　在美国发生PRRSV/PCV2/M.hyo共同感染引起的慢性呼吸道病的育肥猪场,病死率达到10-20%范围并不少见。同样,在急性SIV感染期同时感染PCV2时,病死率可能达10%,即使应用攻击性的治疗方案,这种方案过去用于防止SIV暴发的病死率是高度有效的。由PCV2和M.hyo共同感染(没有PRRSV和SIV)引起的地方流行性呼吸道病也常见,增加了解决麻烦的难度。虽然尚不清楚PCV2所起的作用是否为主要病原体、协同病原体、继发或机会性病原体,独特的肺损害伴随着PCV2抗原的论证当然可以推断PCV2在美国的PRDC中起着重要作用。相反,PRDC在西部加拿大并不重要,很可能因为该地区许多养猪单位没有M.hyo,以及在很多情况下PRRSV毒株的致病力较低。

　　文献记载,伴有PCV2的特征性肺病损有实验证据。在早期的PMWS病例报道中具有细支气管炎的间质性肺炎。Magar等(2000)用SPF猪接种PCV2,产生了除PMWS的特征性淋巴组织病损外,还有支气管间质性肺炎。Harms等(2001)用悉生猪接种PCV2,产生了温和的呼吸道病和支气管间质性肺炎的显微损害。Bolin等到(2001)用不吮初乳猪接种PCV2诱发了温和的呼吸道病和多灶性间质性肺炎。Rovira等(2002)用寻常猪接种PCV2诱发了温和的间质性肺炎和淋巴浆细胞性鼻炎。此外,用SEW猪接种PCV2的传染性克隆,可以产生温和的肉芽肿性支气管间隙质性肺炎。

　　PCV2与其他呼吸道病原体之间的相互作用或协同作用可能是最为重要的事物。用PRRSV和PCV2作实验性共同感染,在实验猪的肺内发现的PCV2核酸或抗原量比单独PCV2感染要多。用PRRSV/PCV2共同感染的实地病例的肺作免疫组织化学检验时一致显现PCV2抗原,证实了PRRSV诱发PCV2增殖增加的实验观察。从诊断证据连同上述描述的模型,有力地证实PCV2在PRDC中的重要作用和加剧了PRRSV-PCV2共同感染的病症。总的来讲,PRDC严重病例的诊断性研究应该包括PCV2的检验,并采取步骤尽量减少PCV2感染的效应。

　　5.PCV2相关性肠炎

　　从有腹泻病史的猪群,表达或不表达衰竭病症,在送交的病例中确定存在PCV2相关性肠炎的现象日益常见。有关兽医送交病例的目的是想实验室肯定由胞内劳森氏菌(Lintracellularis)引起的增生性回肠炎。虽然临床症状和增厚的回肠粘膜的肉眼病损与回肠没有差别,但显微镜检查肯定了存在肉芽肿肠炎和集合淋巴结淋巴细胞缺失。此外,免疫组化染色显示病理损害中有大量PCV2抗原,与PCV2相关性肠炎的确诊是一致的。值得注意的是对上世纪80年代中期的肉芽肿性肠炎病例作回顾性检验,证实了病损与PCV2感染有关。应该考虑PCV2相关的肉芽肿性肠炎与生长一育肥猪的非应答性腹泻有差异。

　　6.PCV2相关性中枢神经系统病(CNS)

　　最早kanitz(1972)把先天性颤抖与一种病毒感染联系起来,Hines和Lukert(1994)首次报道PCV和先天性颤抖之间有潜在联系。这项工作在日期上早于PMWS的发现和PCV2的鉴定,近年的资料进一步证实了这些早期的报道。Stevenson等(2001)近来证实在先天性颤抖猪的脑和脊髓中存在PCV2的核酸和抗原。在实验接种的不吮初乳猪的脑组织中PCV2DNA也存在最多。共同作者之一-Halbur常观察到在美国的PMWS病猪中呈典型病毒性脑炎的非化脓性脑膜脑炎,免疫组化染色有助于在脑炎病损中显示PCV2抗原。证据在继续积累和证实PCV2相关的CNS疾病。